Author(s):
Murteira, Eliana Filipa da Silva 
Date: 2009
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10316/11836
Origin: Estudo Geral - Universidade de Coimbra
Subject(s): Degenerescência macular - idade; Ofalmologia - estudo das causas de degenerescência macular; Mecanismo molecular - estudo; Oxiesterois - produção de IL8
Description
A degenerescência macular relacionada com a idade (DMRI) é a principal causa
de cegueira na população com idade superior a 60 anos no mundo ocidental. Apesar
dos mecanismos moleculares associados à DMRI não serem ainda bem conhecidos, o
stress oxidativo parece desempenhar um papel fundamental no desenvolvimento e
progressão da doença. Alguns estudos recentes sugerem ainda que esta patologia
apresenta uma importante componente inflamatória. Recentemente, o nosso
laboratório demonstrou que a inactivação oxidativa do proteassoma pode contribuir
para alterações celulares e fenotípicas associadas à DMRI. Esta disfunção de
componentes críticos da VUP (via da ubiquitina-proteassoma) poderá constituir um
novo mecanismo que permite associar a lesão oxidativa da retina à expressão de
características fenotípicas próprias da DMRI, nomeadamente o aumento da produção
de mediadores inflamatórios, acumulação de drusen (devido à diminuição no
recrutamento de macrófagos) e neovascularização da retina.
Estudos anteriores, incluindo estudos do nosso laboratório, demonstraram que a
acumulação de produtos da oxidação do colesterol, ou oxiesteróis, em tecidos
oculares, como o cristalino e a retina, está associada ao processo de envelhecimento.
Mais, os oxiesteróis levam a um aumento na produção de citocinas pró-inflamatórias
em vários tipos celulares, incluindo o epitélio pigmentado da retina (EPR). Este
aumento poderá contribuir para a componente inflamatória de diversas doenças
relacionadas com a idade, como a DMRI.
No entanto, os mecanismos moleculares que regulam a expressão de citocinas
inflamatórias nestas condições não são ainda claros. Assim, o principal objectivo deste
estudo foi esclarecer os mecanismos moleculares através dos quais os oxiesteróis
aumentam a produção de IL-8 no EPR. Para isso, uma linha celular humana do EPR
(ARPE-19) foi exposta a diferentes oxiesteróis.
A exposição das células ARPE-19 ao 25-hidroxicolesterol (25-OH) resultou no
aumento da secreção de IL-8, ao passo que os outros oxiesteróis testados diminuíram
os níveis de IL-8. Consistente com um efeito a nível da expressão genética da IL-8, o
tratamento das células ARPE-19 com 25-OH aumentou os níveis de RNA para esta
citocina. Deve ainda acrescentar-se que o 25-OH aumentou a produção de IL-8 no
EPR por um mecanismo independente do stress oxidativo ou da inactivação do
proteassoma. O tratamento das células ARPE-19 com 25-OH resultou ainda na activação da
ERK, mediada pela PI3K. Consistente com este mecanismo, a inibição destas vias de
sinalização diminuiu significativamente a produção de IL-8 em resposta ao 25-OH.
No seu conjunto, os resultados aqui apresentados permitem propor um novo
mecanismo molecular através do qual o 25-OH aumenta a produção de IL-8 em
células do EPR.
Assim, este estudo pode constituir uma contribuição importante para esclarecer
os mecanismos moleculares que conduzem à inflamação no RPE, que é uma
componente importante para doenças degenerativas da retina associadas ao
envelhecimento, incluindo a DMRI.
Palavras-Chave: Degenerescência macular relacionada com a idade, inflamação,
interleucina-8, PI3K, ERK, 25-hidroxicolesterol. Dissertação apresentada à Faculdade de
Ciências e Tecnologia da Universidade de
Coimbra para cumprimento dos requisitos
necessários à obtenção do grau de Mestre
em Engenharia Biomédica
