Avaliação da atividade antioxidante de extratos de própolis e determinação de componentes com relevância fisiológica

• Author(s): Maia, Susana Isabel Carrilho
• Date: 2014
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10451/15885
• Origin: Repositório da Universidade de Lisboa
• Subject(s): Teses de mestrado - 2014
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese
• Advisor(s): Gonçalves, Maria Margarida Boavida Pontes; Marques, Maria Cristina Crespo
• Contributor(s): Repositório da Universidade de Lisboa

Description

Tese de mestrado, Análises Clínicas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2014

Neste trabalho estudaram-se 12 amostras de própolis provenientes de diferentes regiões de Portugal. Estas amostras foram extraídas com soluções hidroalcoólicas a 70% (v/v) e a 96% (v/v), e obtiveram-se rendimentos de extração entre 35,2% (m/m), (P4, Algarve) e 91,6% (m/m), (P9, Vale do Mondego). Os extrato brutos foram avaliados pela reação de Folin-Ciocalteu, reação de sequestração do radical DPPH e determinação da atividade antioxidante de redução férrica. Registaram-se teores de compostos fenólicos totais no própolis bruto, expressos em equivalentes de ácido gálico, entre 70,0 mg/g (P3, Águeda) e 141,5 mg/g (P1, Mealhada/Buçaco), valores de atividade de sequestração do radical DPPH, expressa em equivalentes de ácido gálico, entre 12,7 mg/g (P4, Algarve) e 84,0 mg/g (P9, Vale do Mondego) e valores de capacidade antioxidante de redução férrica (FRAP), expressa em milimoles equivalentes de sulfato ferroso/g entre 0,62 milimoles/g (P4, Algarve) e 2,46 milimoles/g (P7, Serra do Buçaco). As três atividades testadas apresentaram correlações fortes, no conjunto de amostras analisado. Os extratos brutos foram fracionados com hexano e acetato de etilo e estas frações foram caracterizadas por GC-MS. As propriedades funcionais da fração de acetato de etilo foram também determinadas tendo-se obtido resultados análogos aos registados para os extratos brutos. Identificaram-se tentativamente 18 compostos presentes em todas as amostras de própolis analisado exceto o própolis do Algarve e identificaram-se os componentes que mais diferenciam as diferentes amostras: -selineno, -eudesmol, rosifoliol, dihidrocrisina, crisina e crisofanol. Os componentes do própolis cuja concentração apresenta uma correlação mais forte com a sua atividade antioxidante foram: a 3,3a,4,8b-tetrahidro-2H-indeno- [1,2b] -2-furanona, o ácido 3,4-dimetoxicinâmico, o ácido 3,4-metilenodioxicinâmico, o ácido 4-acetoxi-3-metoxicinâmico, a tetocrisina, a dihidrocrisina, a crisina, o crisofanol e um dos derivados da crisina (pico nº16). Finalmente determinaram-se quais os componentes que apresentavam maiores concentrações relativas nos extratos das diferentes amostras: a 2',6'-dihidroxi-4'-metoxichalcona, a dihidrocrisina, a tetocrisina, a crisina e o crisofanol.

This work studied 12 samples of propolis from different regions of Portugal. These samples were extracted with hydroalcoholic solutions of 70% (v/v) and 96% (v/v) and the extraction yields were of 35, 2% (w/w), (P4, Algarve) and 91,6 % (w/w) , (P9, Mondego Valley) . The crude extracts were analyzed by the Folin-Ciocalteu reation, the reaction of sequestration of the DPPH radical and the determination of the antioxidant activity of ferric reduction. The levels of phenolic compounds in crude propolis, were expressed as gallic acid equivalents and varied between 70,0 mg/g (P3, Agueda) and 141,5 mg/g (P1, Aveiro/Buçaco); the values of the activity of sequestration of the DPPH radical were expressed as gallic acid equivalents, and varied between 12,7 mg/g (P4, Algarve) and 84.0 mg/g (P9, Mondego Valley); the values of ferric reduction antioxidant capacity (FRAP), were expressed as millimoles of ferrous sulfate equivalents/g and varied between 0,62 millimoles/g (P4, Algarve) and 2,46 mmol/g ( P7, Buçaco Mountain) . The three activities tested showed strong correlations in the set of samples analyzed. Crude extracts were fractionated with hexane and ethyl acetate, and these fractions were characterized by GC-MS. The functional properties of the ethyl acetate fraction were also determined and the results obtained were analogous to the ones reported for the crude extracts. The tentative identification of 18 compounds present in all samples analyzed (except the propolis from Algarve) was performed and the components that most differentiate the different samples were identified as: - selinene, - eudesmol, rosifoliol, dihydrochrysin, chrysin and chrysophanol. The components of propolis whose concentration has a strong correlation with their antioxidant activity were 3,3a,4,8b-tetrahydro-2H-inden-[1,2b]-2-furanone, 3,4- dimethoxycinnamic acid, 3,4-metilenodioxycinnamic acid, 4-acetoxy-3- methoxycinnamic acid, tectochrysin, dihydrochrysin, chrysin, chrysophanol and one derivative of chrysin (peak No. 16). Finally it was determined which components had higher relative concentrations in the extracts of the different samples: 2',6'- dihydroxy -4'- metoxichalcone, dihydrochrysin, tectochrysin the chrysin and chrysophanol.