Estudo da susceptibilidade do VIH-2 à inibição por moléculas inibidoras do co-recptor CCR5

• Author(s): Espírito Santo, Maria
• Date: 2010
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10451/2384
• Origin: Repositório da Universidade de Lisboa
• Subject(s): HIV-2; Receptores CCR5; Receptores CXCR4; Inibidores de proteases; Teses de mestrado - 2010
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese
• Advisor(s): Pereira, José Miguel Azevedo, 1962-
• Contributor(s): Repositório da Universidade de Lisboa

Description

Tese de mestrado, Microbiologia Clínica, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2010

Até à data deste trabalho, poucos estudos têm sido feitos para determinar a susceptibilidade do VIH-2 aos antagonistas dos co-receptores (CoR). Estes pertencem a um grupo de inibidores de entrada com um novo mecanismo de acção, agindo fora da célula, ligam-se ao CoR, impedindo a sua utilização durante a entrada viral, ao contrário dos outros inibidores já existentes, que têm por alvo, proteínas do HIV. Neste estudo, determinou-se a susceptibilidade do HIV-2 aos inibidores do CCR5 (TAK-779, MVC, PF-2221753 e mAb2D7) e do CXCR4 (SDF-1alpha e o mAb12G5), usando seis estirpes VIH-2 isoladas e caracterizados no nosso laboratório, e utilizando a estirpe HIV- 1BaL como controlo. Para os ensaios de inibição, utilizou-se a linha celular humana obtida dum osteossarcoma (GHOST) que expressa o receptor CD4 e o co-receptor CCR5 ou CXCR4. A replicação viral foi monitorizada pela detecção do Ag p24 nos sobrenadantes da cultura. Os resultados demonstraram que o TAK-779, MVC e o PF-227153 inibiram eficientemente todas as estirpes HIV-2 enquanto o mAb2D7, inibiu apenas a estirpe HIV-2ALI. Verificou-se ainda que o SDF-1alpha inibiu três das quatro estirpes estudadas, enquanto o mAb12G5 teve um efeito inibitório menor quando comparado com o SDF-1alpha. Estes resultados permitem-nos concluir que: os antagonistas do CCR5 analisados são mais eficientes para o HIV-2 do que para o HIV-1BaL e que o SDF-1alpha é mais eficaz quando comparado com o mAb12G5 para a inibição das estirpes. Estes resultados sugerem assim novas direcções e soluções terapêuticas no combate à infecção por HIV-2.

Until the date of this work, little is known about HIV-2 susceptibility to coreceptor (CoR) antagonists (CCR5 and CXCR4 antagonists). These belong to a group of entry inhibitors with a novel mechanism of action, acting outside the cell by binding to CoR and preventing its use during viral entry, unlike the other existing drugs that target HIV proteins. In this study we determine the susceptibility of HIV-2 to CCR5 (TAK-779, MVC, PF- 2221753, mAb2D7) and CXCR4 (SDF-1alpha and mAb12G5) inhibitors using six strains previously isolated and characterized in our laboratory. HIV-1BaL was used as control. Inhibition assays, were done using human osteosarcoma cell line (GHOST) coexpressing CD4 and the CoR CCR5 or CXCR4 and viral replication was monitored by Ag p24 detection in culture supernatant. The results indicated that TAK-779, MVC and PF-227153, efficiently inhibited all HIV-2 strains. Regarding mAb2D7, only inhibited the HIV-2ALI strain. It was also possible to demonstrate that SDF-1alpha inhibited three of the four strains studied, while mAb12G5 had lower inhibitory effect when compared to the SDF-1alpha. These results enable us to conclude that the CCR5 antagonists under study are more efficient for HIV-2 than for HIV-1BaL and that SDF-1alpha is more effective when compared with mAb12G5 to the inhibition of these strains. Finally, these findings also suggest new directions and therapeutic solutions to the control of HIV-2 infection.