Estudo da actividade antitumoral de complexos de Molibdénio (II)

• Author(s): Lopes, Miguel Mateus dos Santos
• Date: 2010
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10451/9214
• Origin: Repositório da Universidade de Lisboa
• Subject(s): Bioquímica; Teses de mestrado - 2010
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese
• Advisor(s): Meireles, Margarida, 1955-
• Contributor(s): Repositório da Universidade de Lisboa

Description

Tese de mestrado em Bioquímica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2010

O cancro, uma das maiores causas de morte no Mundo, é sem dúvida a doença para cuja cura mais esforços têm sido mobilizados. O meu trabalho insere-se nesse objectivo. Foram realizados vários ensaios para avaliar do ponto de vista bioquímico a possível ação de dois compostos de molibdenio(II), T1 e B2, pertencentes a uma família de complexos previamente testada, que contem dois ligandos diferentes, um neutro (L1 ou L2) e um aniónico (brometo ou triflato). Efectuaram-se testes para avaliar a actividade citotóxica dos compostos em três linhas celulares distintas, HeLa (cancro do colo do utero), MCF-7 (cancro da mama) e RPE (epitelio da retina, única linha não-tumoral), a sua cinética de ação e quantificar o molibdenio intracelular. Os compostos demonstraram possuir um efeito antiproliferativo poderoso, com IC50 entre 1 e 23 μM. A quantificação do molibdénio intracelular revelou uma dependência directa da quantidade de molibdenio intracelular com a concentração de composto incubado com as células. Estudos de estabilidade dos complexos em solução, da sua condutividade elétrica e do coeficiente de partição octanol-agua mostraram que os compostos eram estáveis em solução aquosa, e tinham baixa (B2) ou nenhuma (T1) condutividade e caracter hidrofóbico (coeficientes de partição positivos). A incubação de DNA plasmídico com os compostos sugeriu a alteração do seu padrão de migração em gel de agarose, pois a migração das bandas do DNA plasmídico foi retardada de forma dependente da sua concentração. Experiências de titulação de DNA com os compostos revelaram hipocromismo e batocromismo nos espectros após a titulação com DNA, parecendo haver interação com o DNA através de intercalação. Estes resultados demonstram que estes compostos são promissores e que mais estudos devem ser feitos no sentido de compreender o seu mecanismo de ação.

Cancer is responsible for one of the largest death causes worldwide and has been the object of more efforts towards its cure than many others. Still the available chemotherapy treatment is not in general sufficiently effective. This work aims at contributing to solve this issue, by evaluating from a biochemical point of view two different molybdenum(II) compounds, T1 and B2, belonging to a previously tested family of molybdenum complexes, which differ by two ligands, a neutral one (L1 or L2) and an anionic one (bromide or triflate). Tests to evaluate the cytotoxic activity of these compounds were performed against three cell lines, HeLa (cervical cancer), MCF-7 (breast cancer) and RPE (retinal epithelium, only non-tumoral cell line), and both their kinetic of action and the intracellular molybdenum were investigated. These studies revealed a powerful cytotoxic effect against all cell lines, with IC50 ranging from 1 to 23 μM. The cytotoxicity of T1 always changed with incubation time, but stayed almost constant with B2. The intracellular molybdenum depended on the concentration of the complex incubated with cells in both cases. Other studies addressed the stability of the complexes in aqueous solution and the octanol/water partition coefficient. The two compounds were very slowly oxidized in solution, according to mass spectroscopy results, and exhibited hydrophobic properties (positive partition coefficients). Plasmid DNA incubated with complexes was evaluated, and showed that the complexes retarded plasmid DNA migration in electrophoresis gels in a concentration dependent way. DNA titrations with varying amounts of complexes were also carried out. The electronic spectra of both complexes showed hypochromism and batochromism of the maximum absorption band in DNA titrations, suggesting that intercalation in DNA could be taking place. These compounds seem thus promising and further study is required in order to understand fully the mechanisms leading to their cytotoxicity.