Author(s):
Miguel, Sónia Alexandra Pereira
Date: 2013
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.6/4149
Origin: uBibliorum
Subject(s): Cicatrização de feridas - Hidrogel; Cicatrização de feridas - Actividade antimicrobiana; Cicatrização de feridas - Biocompatibilidade; Regeneração da pele - Hidrogel; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas::Ciências Biomédicas
Description
Skin lesions are traumatic events that lead to increased fluid loss, infections, scars formation and the appearance of immunocompromised regions. The loss of skin integrity can result in significant physiological imbalances and disability or even death. Skin functionality must be restored quickly in order to maintain homeostasis. Researchers have been developing new systems to accelerate the healing process. Although the many skin substitutes available in the market, there is none that promotes full restoration of the native structure of skin. Among the various materials used to cover the wound immediately after injury, hydrogels are the most studied. The hydrogels are made of a highly hydrophilic polymeric network forming a three dimensional structure very similar to the extracellular matrix, that allows cell growth. Moreover, hydrogels are biocompatible, biodegradable and have porous structures that allow cell internalization and proliferation within its structure and promote the diffusion of gases, nutrients and waste products. Currently, new hydrogels that respond to external stimuli such as pH, and temperature have been extensively studied in tissue engineering. Thus, the work plan of this master thesis had as main goal to produce a hydrogel composed of deacetylated chitosan and agarose, formed at body temperature (37°C), in order to verify their applicability in the treatment of wounds. The hydrogel structure was initially characterized by Fourier transform infrared spectroscopy. Its inner and surface morphology was characterized by scanning electron microscopy. Cellular adhesion and internalization into the porous structure of the hydrogel was visualized by confocal and scanning electron microscopy. The cytotoxicity profile of the hydrogel was characterized through cell viability assays, and the results obtained confirmed the biocompatibility of the hydrogel. The antimicrobial activity of the hydrogel was also evaluated and the results showed that the hydrogel inhibits the growth, at the surface, of the most common microorganism in skin infection. The results obtained demonstrated that this 3D network has the suitable properties for improving the healing process of cutaneous wounds.
As lesões na pele são acontecimentos traumáticos que levam ao aumento da perda de fluidos, a infecções, à formação de cicatrizes e ao aparecimento de regiões imunocomprometidas. A perda da integridade da pele pode resultar em desequilíbrios fisiológicos e incapacidade significante ou mesmo até a morte do paciente. A funcionalidade da pele deve ser restaurada rapidamente, de forma a manter a homeostase. Os investigadores têm procurado desenvolver novos substitutos de pele que permitam acelerar o processo de cicatrização. Apesar de já existirem muitos substitutos de pele disponíveis no mercado, ainda não existe nenhum que promova o restabelecimento da estrutura nativa da pele, na sua totalidade. Entre os mais variados materiais utilizados para cobrir a ferida, imediatamente após a lesão, os hidrogéis são a classe de materiais mais estudada. Os hidrogéis são constituídos por uma rede polimérica altamente hidrofílica, que forma uma estrutura tridimensional muito semelhante à matriz extracelular. Os hidrogéis promovem a adesão e o crescimento celular. Normalmente, os hidrogéis apresentam estruturas porosas que possibilitam a internalização e proliferação das células no seu interior, a difusão de gases, nutrientes e resíduos. Alem disso, os hidrogéis são biocompatíveis e biodegradáveis. Atualmente, os hidrogéis que respondem a estímulos externos como o pH, temperatura têm sido amplamente estudados na engenharia de tecidos. Assim, o plano de trabalhos deste mestrado teve como objetivo a produção de um hidrogel constituído por quitosano desacetilado e agarose, o qual se forma à temperatura corporal (37°C), para ser aplicado no tratamento de feridas cutâneas. A composição química do hidrogel foi analisada por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier e a morfologia da superfície e do interior foi caraterizada por microscopia electrónica de varrimento. A visualização da adesão e internalização celular no hidrogel foi conseguida através de imagens de microscopia electrónica de varrimento e confocal. O perfil citotóxico do hidrogel foi caraterizado através de testes de viabilidade celular, os quais confirmaram a biocompatibilidade do hidrogel. A atividade antimicrobiana do hidrogel foi também avaliada e os resultados obtidos confirmaram que o hidrogel inibe à sua superfície, o crescimento do microorganismo mais comum em infecções cutâneas (Staphylococcus aureus). Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que o hidrogel desenvolvido possui as propriedades adequadas para ser usado na regeneração das feridas cutâneas.