Será que o plexo coróide pode cheirar?

• Author(s): Tavares, Gabriela Pires
• Date: 2012
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.6/726
• Origin: uBibliorum
• Subject(s): Plexo coróide; Líquido cefalorraquidiano; Transdução olfactiva; Receptores olfactivos; Sistema olfactivo
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese
• Contributor(s): uBibliorum

Description

O plexo coróide (CP) é uma estrutura ramificada e altamente vascularizada que se encontra alojada nos ventrículos cerebrais, formando uma interface única entre o sangue e o líquido cefalorraquidiano, CSF. A principal função deste tecido é a formação do CSF, através do qual, o CP fornece nutrientes e um conjunto vasto de neuropéptidos que nutrem e protegem todo o sistema nervoso central (SNC). O CP é por isso um tecido importantíssimo para manter o equilíbrio de todo o SNC, pela monitorização e manutenção do ambiente bioquímico extracelular cerebral. Um estudo de “microarrays” de cDNA, realizado previamente no laboratório do CICS, em CPs de ratos Wistard Han, machos e fêmeas, permitiu constatar que existem uma série de vias de sinalização reguladas pelas hormonas sexuais, entre as quais, a via de transdução olfactiva. Neste contexto e uma vez que as proteínas que constituem a via de transdução olfactiva foram já identificadas noutros tecidos, mostrando-se esta, activa e funcional, realizou-se este estudo com o objectivo de comprovar a expressão das mesmas proteínas no CP de rato e prever a funcionalidade da transdução olfactiva neste tecido. A análise da transcrição do RNAm foi desenvolvida por RT-PCR e PCR em tempo real e a expressão das proteínas foi comprovado por Western blot, imunohistoquimica e imunofluorescência. Todos os principais constituintes da via olfactiva foram identificados no CP: os receptores olfactivos (OR 63, OR 19, OR 600, OR 620/624 e OR 1496), a adenil ciclase tipo III (ACIII) e a subunidade α da proteína G específica do olfacto (Gαolf). Os resultados obtidos neste trabalho experimental sugerem que a cascata de sinalização da transdução olfactiva pode estar activa no CP, uma vez que as várias proteínas que a constituem se encontram expressas neste tecido. Esta via pode regular a monitorização do CSF, através de moléculas químicas solúveis neste fluido, induzindo respostas celulares de acordo com as necessidades fisiológicas do SNC.

The choroid plexuses (CPs) are highly vascularized branched structures that protrude into the ventricles of the brain, and form a unique interface between the blood and the cerebrospinal fluid (CSF). The best recognized function of the this tissue is cerebrospinal fluid (CSF) production, from which, CP nourish and protect all central nervous system(CNS), providing nutrients and a set of neuropeptides as cytokines and metabolizing enzymes, growth factors and hormones. Therefore CP plays an important role monitoring and buffering extracellular brain fluid, which keeps in balance of all CNS. A CP microarray study was performed, in our investigation center, in order to understand CP transcriptome and particularly, the effect of sex hormones in the total transcriptome. The analysis of microarray results allowed the identification of several up and down regulated pathways and revealed that one of the principal ones was the olfactory transduction. Olfactory-like chemosensory signalling occurs outside the olfactory epithelium, in other tissues where it also monitors the composition of body fluids. This work aims at analyzing if the olfactory machinery is expressed in the CP and forecast its functionality in this tissue. The RNA analysis was performed by real-time PCR and conventional PCR, and protein analysis by western blot, immunohistochemistry and immunofluorescence. We found that major components of olfaction, including olfactory receptors (OR 63, OR 19, OR 600, OR 620/624 e OR 1496), olfactoryrelated adenylate cyclase (ACIII) and olfactory G protein (Gαolf), are expressed in the CP. These results suggest that olfactory-like chemosensory pathway might be active in CP and could function as a detector of soluble chemical molecules in CSF therefore inducing cellular responses according to CNS physiological needs.