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Estudo imunohistoquímico do Ki-67 em adenocarcinomas do cólon

Author(s): Agostinho, Catarina Sofia Freire

Date: 2010

Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.6/743

Origin: uBibliorum

Subject(s): Adenocarcinoma do cólon; Adenocarcinoma do cólon - Proliferação tumoral; Adenocarcinoma do cólon - Diferenciação tumoral; Adenocarcinoma do cólon - Imunohistoquímica


Description

Introdução: O estudo do comportamento dos tumores constitui actualmente uma área de grande interesse, pela sua importância no estabelecimento de prognósticos e tratamentos adequados a cada doente. A diferenciação e a proliferação tumoral constituem factores que podem ser úteis na caracterização dos adenocarcinomas do cólon. O facto de o Ki-67 ser um proteína que está presente exclusivamente na fase activa da célula faz dele um bom marcador de proliferação celular. A sua utilização nos adenocarcinomas do cólon foi ainda pouco estudada, sendo os resultados pouco consensuais no que toca à relação entre a proliferação tumoral, determinada pelo Ki-67, e a diferenciação. Este estudo constitui um contributo para esse esclarecimento. Objectivos: Observar e descrever a possível correlação entre a expressão imunohistoquímica do marcador de proliferação tumoral Ki-67 e o grau de diferenciação histológica de adenocarcinomas do cólon. Materiais e métodos: Foram estudados 62 casos de adenocarcinomas do cólon que foram excisados cirurgicamente entre 2001 e 2003 no Centro Hospitalar Cova da Beira. O processamento histológico decorreu segundo procedimento de rotina com hematoxilina-eosina, e a classificação histológica dos tumores foi feita segundo os critérios da Organização Mundial de Saúde. A avaliação da expressão imunohistoquímica do Ki-67 foi realizada utilizando-se o anticorpo monoclonal dirigido ao antigénio Ki-67 humano, MIB-1. Com base na detecção do anticorpo primário com o método de estreptavidina-biotina marcada, e através da diaminobenzidina como cromogéneo, os locais reconhecidos pelo anticorpo primário foram assim marcados e visualizados em cor castanha. A classificação da marcação foi realizada segundo a intensidade e a quantidade de células marcadas. Resultados: Dos 62 adenocarcinomas, 5 (8,06%) eram bem diferenciados, 55 (88,70%) moderadamente diferenciados e 2 (3,23%) pouco diferenciados, não tendo existido nenhum caso classificado como indiferenciado. Os adenocarcinomas pouco diferenciados apresentavam ambos 50 a 75% das células coradas com intensidade “++”. Dos bem diferenciados, um foi Ki-67 negativo, sendo os restantes quatro positivos com diferentes quantidades e intensidades. Os adenocarcinomas moderadamente diferenciados foram em 61,82% dos casos negativos para o Ki-67. Existiu coincidência entre a intensidade “+++” e a quantidade de células imunomarcadas máxima observada (50 a 75%) em 38,09% dos adenocarcinomas moderadamente diferenciados. Conclusão: Não foi possível estabelecer uma correlação entre a diferenciação histológica e a proliferação do tumor determinada pela presença da proteína Ki-67.

Introduction: The tumours behaviour is currently an area of great interest for its importance in establishing prognostics and appropriate treatment for each patient. The tumour differentiation and proliferation are factors that may be useful in the characterization of colon adenocarcinomas. Ki-67 is a protein that presents exclusively at the active phase of cells, what makes it a good marker of cellular proliferation. Its use in colon and the results were not consensual regarding the relationship between tumour proliferation and its differentiation. This study is a contribution to that clarification. Objectives: To observe and describe the possible correlation between the expression of proliferation tumour marker Ki-67, determined by immunohistochemistry techniques, and histologic diferenciation of adenocarcinomas of the colon. Methods and Materials: We studied 62 cases of colon adenocarcinoma which were surgically excised between 2001 and 2003 in Centro Hospitalar Cova da Beira (Covilhã, Portugal). Histologic processing ran according routine procedure with hematoxylin-eosin, and histologic classification of tumours was made according to criteria of the World Health Organization. The evaluation of the tumour proliferation marker Ki-67 expression was performed using the monoclonal antibody directed to human antigen Ki-67, MIB-1. Based on primary antibody detection with labeled streptavidin-biotin, and using the chromogen-diaminobenzidine, sites recognized by the primary antibody were marked and visualized with a brownish colour. The immunostaining classification was performed according to the intensity and amount of marked cells. Results: Of the 62 carcinomas, 5 (8.06%) were well differentiated, 55 (88.70%) moderately differentiated and 2 (3.23%) poorly differentiated, with none undifferentiated case. The poorly differentiated adenocarcinomas had both 50- 75% immunostained cells with intensity “++". Of the 5 well differentiated cases, 1 was Ki-67 negative and the remaining 4 were positive with different amounts and intensities. The moderately differentiated adenocarcinomas were Ki-67 negative in 61.82% of cases. There was coincidence in 38.09% of moderately differentiated adenocarcinomas between intensity “+++” and the existence of an amount of 50-75% immunostained cells. Conclusions: It was impossible to establish the relation between histologic differentiation and tumour proliferation determined by immunostaining techniques with Ki-67.

Document Type Master thesis
Language Portuguese
Advisor(s) Muñoz Moreno, Javier
Contributor(s) uBibliorum
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