Autor(es):
Maiato, Helder José Martins 
Data: 2002
Identificador Persistente: http://hdl.handle.net/10216/10474
Origem: Repositório Aberto da Universidade do Porto
Detalhes do Documento
Microtubule-associated proteins in kinetochore function and spindle assembly
Descrição
A segregação cromossómica durante a mitose é mediada por uma maquinaria dinâmica e complexa que tem como base microtúbulos e que se designa por fuso mitótico. Alguns dos princípios básicos por detrás dos mecanismos responsáveis pela formação e função do fuso têm vindo a ser esclarecidos através da descoberta e caracterização de numerosas proteínas associadas aos microtúbulos. A maioria destas proteínas podem ser classificadas como motoras, que geram força e movimento através da superfície dos microtúbulos, ou como proteínas associadas aos microtúbulos convencionais (MAPs), muitas das quais se pensa estabilizarem os microtúbulos. Enquanto é sabido que as proteínas motoras participam em numerosos eventos mitóticos, as funções mitóticas das MAPs permanecem amplamente desconhecidas. A nossa investigação deste problema foi iniciada pelo estudo de mutações no gene mast (multiple asters) em Drosophila melanogaster. A análise citológica de células mutantes para o gene mast revelou que estas se acumulam em prometafase com cromossomas altamente condensados organizados em forma de círculos e elevada poliploidia, sugerindo um papel na formação de um fuso funcional e na saída de mitose. Tirou-se partido de uma inserção de um elemento P no allelo mast1 para a clonagem do gene e descobriu-se que codificava para uma nova proteína associada aos microtúbulos extremamente conservada desde as leveduras até aos humanos. De forma a determinar a função da MAST durante a mitose, realizou-se uma técnica de interferência com ARNs de cadeia dupla em células de cultura S2 de Drosophila e descobriu-se que, na ausência da MAST, estas são incapazes de formar uma placa metafásica e em alternativa formam fusos monopolares com os cromossomas localizados perto do centro astral. Nestas células, os cinetocóros não se ligam nas extremidades ou estão associados com microtúbulos muito curtos. Notavelmente, quando a dinâmica dos microtúbulos é suprimida em células deficientes para a MAST, os cromossomas ... Dissertação de Doutoramento em Ciências Biomédicas apresentada ao Instituto de Ciências Biomédicas de Abel Salazar da Universidade do Porto
A segregação cromossómica durante a mitose é mediada por uma maquinaria dinâmica e complexa que tem como base microtúbulos e que se designa por fuso mitótico. Alguns dos princípios básicos por detrás dos mecanismos responsáveis pela formação e função do fuso têm vindo a ser esclarecidos através da descoberta e caracterização de numerosas proteínas associadas aos microtúbulos. A maioria destas proteínas podem ser classificadas como motoras, que geram força e movimento através da superfície dos microtúbulos, ou como proteínas associadas aos microtúbulos convencionais (MAPs), muitas das quais se pensa estabilizarem os microtúbulos. Enquanto é sabido que as proteínas motoras participam em numerosos eventos mitóticos, as funções mitóticas das MAPs permanecem amplamente desconhecidas. A nossa investigação deste problema foi iniciada pelo estudo de mutações no gene mast (multiple asters) em Drosophila melanogaster. A análise citológica de células mutantes para o gene mast revelou que estas se acumulam em prometafase com cromossomas altamente condensados organizados em forma de círculos e elevada poliploidia, sugerindo um papel na formação de um fuso funcional e na saída de mitose. Tirou-se partido de uma inserção de um elemento P no allelo mast1 para a clonagem do gene e descobriu-se que codificava para uma nova proteína associada aos microtúbulos extremamente conservada desde as leveduras até aos humanos. De forma a determinar a função da MAST durante a mitose, realizou-se uma técnica de interferência com ARNs de cadeia dupla em células de cultura S2 de Drosophila e descobriu-se que, na ausência da MAST, estas são incapazes de formar uma placa metafásica e em alternativa formam fusos monopolares com os cromossomas localizados perto do centro astral. Nestas células, os cinetocóros não se ligam nas extremidades ou estão associados com microtúbulos muito curtos. Notavelmente, quando a dinâmica dos microtúbulos é suprimida em células deficientes para a MAST, os cromossomas ... Dissertação de Doutoramento em Ciências Biomédicas apresentada ao Instituto de Ciências Biomédicas de Abel Salazar da Universidade do Porto
Tipo de Documento
Tese de Doutoramento
Idioma Português
Idioma Português
