Potencial de subst??ncias coloridas produzidas por fungos endof??ticos amaz??nicos para o diagn??stico bacilosc??pico da tuberculose .

• Autor(es): Lima, Alita Moura de
• Data: 2015
• Origem: Oasisbr
• Assunto(s): Subst??ncias coloridas; Diagn??stico; Tuberculose; Colored substances; Diagnosis; Tuberculosis; CI??NCIAS BIOL??GICAS
• Tipo de Documento: Tese de doutoramento
• Idioma: Português

Descrição

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alita Moura de Lima.pdf: 2197035 bytes, checksum: 64774d32c0950f346e45e0226627e35a (MD5) Previous issue date: 2013-10-31

Funda????o de Amparo ?? Pesquisa do Estado do Amazonas

Tuberculosis (TB), an infectious disease that occurs in 90% of cases in the lungs, is caused by Mycobacterium tuberculosis. Although TB has been described since antiquity, being diagnosed about 100 years and has treatment from the 40s, is currently still considered a serious public health problem, being reported annually 1.1 million deaths worldwide. Knowing that the cycle of transmission of tuberculosis involving almost exclusively the human, being one of the targets for global TB control is the diagnosis, this being vital to break the chain of transmission. The Global Tuberculosis Control Programmes use bascilloscopies (microscopic detection of bacilli)as their first choice in the diagnosis of pulmonary tuberculosis. However, carbolfucsina, the dye solution used in this method is a toxic carcinogenic compound which contaminates water and endagers human health. In order to verify the potential of coloured substances produced by fungi endophytic filamentous to replace carbolfucsina, endophytes derived from vegetables H. sucuuba , C. multijuga , P. aduncum and S. reticulata were analyized. From 75 isolates, 30 were selected with capacity to produce coloured diffusible substances in solid medium. The culture filtrates were tested in for their ability to stain smears prepared from the standard strain of Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Analysis of the staining was performed by bright field and fluorescence microscopy. Fluorescence substances identified as proteins by the Bradford technique, present in 78% of the culture filtrates, enabled the visualization of M. tuberculosis H37Rv. When the culture filtrates were tested with other microorganisms (E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 25923 and C. albicans ATCC 36232) they were found to be nonspecific for M. tuberculosis. Despite the negative result of the proposed objective, there is potential for fluorescent proteins to be used in monitoring cell, tissue and protein interactions.

A tuberculose (TB), doen??a infecciosa que acomete em 90% dos casos os pulm??es, ?? causada principalmente pelo Mycobacterium tuberculosis. Embora a TB tenha sido descrita desde a antiguidade, ser diagnosticada a mais de 100 anos e possuir tratamento desde a d??cada de 40, atualmente ainda ?? considerada um grave problema de sa??de p??blica, sendo registrados anualmente 1,1 milh??es de ??bitos no mundo. Sabendo-se que o ciclo de transmiss??o da tuberculose envolve quase que exclusivamente o ser humano, um dos alvos para o controle global da doen??a ?? o diagn??stico, sendo esse vital para a quebra da cadeia de transmiss??o. Os Programas Mundiais de Controle da Tuberculose consideram a baciloscopia como a primeira op????o para diagn??stico da Tuberculose pulmonar. No entanto, a solu????o corante de carbolfucsina utilizada na t??cnica ?? um composto t??xico, carcinog??nico, combust??vel e contaminante da ??gua. Com o objetivo de verificar o potencial de subst??ncias coloridas produzidas por fungos endof??ticos filamentosos em substitui????o ?? carbolfucsina, foram analisados endof??ticos oriundos dos vegetais Himatanthus sucuuba, Copaifera multijuga, Piper aduncum e Senna reticulata. A partir de 75 isolados, foram selecionados 30 com capacidade de produzir subst??ncias coloridas difus??veis em meio s??lido. Os filtrados do cultivo em caldo foram testados quanto ?? capacidade de colora????o em esfrega??os preparados a partir da cepa padr??o de Mycobacterium tuberculosis H37Rv. A an??lise da colora????o foi realizada por microscopia em campo claro e em fluoresc??ncia. Constatou-se a exist??ncia de capacidade de fluoresc??ncia em 78% dos filtrados de cultivo sobre as unidades bacilares de M. tuberculosis. No entanto, quando os filtrados foram submetidos a testes de colora????o em outros microrganismos, Escherichia coli ATCC 25922; S. aureus ATCC 25923 e Candida albicans ATCC 36232, constatou-se serem inespec??ficos para M. tuberculosis. Em an??lise de caracteriza????o qu??mica a subst??ncia respons??vel pela fluoresc??ncia apresentou caracter??sticas compat??veis com prote??nas. Nesse sentido, apesar do resultado negativo ao objetivo proposto, tem-se a possibilidade da descoberta de prote??nas fluorescentes que v??m sendo utilizadas como reveladores na monitora????o de c??lulas, tecidos e na intera????o entre prote??nas.