Contribui????o ao estudo bot??nico, qu??mico e farmacol??gico de plantas medicinais da Amaz??nia contra Leishmania sp.

• Author(s): Moura, Dominique Fernandes de
• Date: 2015
• Origin: Oasisbr
• Subject(s): Piper duckei; Piper demeraranum; Leishmaniose; CI??NCIAS EXATAS E DA TERRA: QU??MICA
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese

Description

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:01:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Final Dominique Fernandes.pdf: 3166096 bytes, checksum: f8031d05513bd1aa29db0b499d2f7bbe (MD5) Previous issue date: 2008-03-10

Funda????o de Amparo ?? Pesquisa do Estado do Amazonas

The discovery of natural substances found in plants has been a target of several scientific studies, as urgency for drugs more selective and less toxic for the treatment of incurable diseases. Leishmaniasis is a major disease with priority for research according to the World Health Organization. This study selected three botanical species in the search for new chemical therapies against this disease. Vismia cayennensis (Clusiaceae), Piper duckei (Piperaceae) e P. demeraranum (Piperaceae) are medicinal native species of Brazil, used by people to treat skin diseases and healing of wounds. The phytochemical study of the barks and fruits of V. cayennensis was carried out resulting in four extracts ethanolic, hexanic, chloroformic of fruit and dichloromethane of barks. The study of hexane extract resulted in the isolation and identification a mixture of steroids (sytosterol and stygmasterol), and Fridelin, a Triterpene, already isolated from the specie. The leishmanicidal activity of the extracts and Fridelin were evaluated against promastigotes forms of L. amazonensis and L. guyanensis, the chloroform and hexane extracts showed strong activity leishmanicidal for the two species, showing DL 50 = 32,4 ??g/mL (L. amazonensis), 9,1 ??g/mL (L. guyannensis) e 8,9 ??g/mL (L. amazonensis), 19,7 ??g/mL (L. guyannensis), respectively. However the Fridelina showed moderate activity to promastigotes forms of L. amazonensis with LD50 = 231,21 ??g /mL. The extract chloroform of the fruit was fractionated resulting in the isolation of two compounds, identified like the antranoid prenylated, Vismin and Ferruginin. The leishmanicidal activity this compounds were weak in relation to the crude extract with LD50 = 178,3 ??g /mL and DL50 = 214,8 ??g/mL, respectively. The extracts, fractions and phytochemicals isolates were also evaluated as antioxidant activity and toxicity front of the microcrust??ceo Artemia salina. Essential oils of the leaves were obtained by hydrodestillation and analyzed by GC/MS. The major constituents identified in the leaf of Piper duckei oil were trans-caryophyllene (29,62%), Germacrene D (15,92%) e 1H-Cicloprop[e]azulen (19,20%) while in the P. demeraranum oil was observed ??- elemene (34.50%), dl-limonene (20.56%), Germacrene B (9.11%), Germacrene D (5.36%) e ??-Selinene (5.20%). It was evaluated the leishmanicidal activity of oils. The species P. duckei showed inhibition of 50% of the parasites in the concentration 70 ??g/mL, while the species P. demeraranum presented LD50 = 91.51 ??g/mL. To the strain of L. guyanensis strain the oils showed a pronounced leishmanicidal activity with LD50 = 15.2 ??g/mL for P. duckei and 22.7 ??g/mL for P. demeraranum. It was evaluated the toxicity of oils in macrophage cells removed from the intraperitoneal cavity of mice; oils showed low cytotoxicity, encouraging future tests in amastigotes forms of Leishmania. The irritant potential of oils was also evaluated by the method HET - CAM, the data were very promising featuring oils with moderate skin irritation.

A busca de mol??culas naturais bioativas presentes em plantas tem sido alvo de diversos estudos cient??ficos, como urg??ncia por drogas mais seletivas e menos t??xicas no tratamento de doen??as incur??veis. A leishmaniose ?? uma das principais doen??as com prioridade de pesquisa segundo a Organiza????o Mundial de sa??de. O presente trabalho selecionou as esp??cies bot??nicas, Vismia cayennensis (Clusiaceae), Piper duckei (Piperaceae) e P. demeraranum (Piperaceae), na busca de novas terapias qu??micas contra esta doen??a. As esp??cies mencionadas s??o plantas medicinais nativas do Brasil, usadas pela popula????o no tratamento de dermatoses e como cicatrizante de ferida. O estudo fitoqu??mico das cascas e frutos de V. cayennensis foi realizado obtendo-se quatro extratos, etan??lico, hex??nico, diclorometano das cascas e clorof??rmico dos frutos. O fracionamento do extrato hex??nico resultou no isolamento e identifica????o de uma mistura de ester??ides (sitosterol e estigmasterol) e de Fridelina, um triterpeno j?? isolado da esp??cie. Foi avaliada a atividade leishmanicida dos extratos e da Fridelina frente ??s formas promastigotas de L. amazonensis e L. guyanensis, os extratos hex??nico e clorof??rmico indicaram forte atividade leishmanicida frente ??s duas esp??cies, L. amazonensis e L. guyanensis, apresentando DL 50 de 32,4 ??g/mL (L. amazonensis), 9,1 ??g/mL (L. guyanensis) e 8,9 ??g/mL (L. amazonensis), 19,7 ??g/mL (L. guyanensis), respectivamente. A Fridelina isolada do extrato hex??nico das cascas, n??o foi eficaz, apresentando moderada atividade frente ??s formas promastigotas de L. amazonensis (DL50 = 231,21 ??g/mL). O extrato clorof??rmico dos frutos foi fracionado resultando no isolamento de dois compostos, identificados atrav??s de perfis cromatogr??ficos e espectrom??tricos, como sendo os antran??ides prenilados, Vismina e Ferruginina. As atividades leishmanicida das subst??ncias foram fracas em rela????o ao extrato bruto, com DL50 = 178,3 ??g/mL e DL50 = 214,8 ??g/mL, respectivamente. Os extratos, fra????es e fitoconstituintes isolados tamb??m foram avaliados quanto atividade antioxidante e toxicidade frente ao micrcrust??ceo Artemia salina. Foram estudados os ??leos essenciais das folhas de P. duckei e P. demeraranum, extra??dos atrav??s da t??cnica de hidrodestila????o, e posteriormente analisados por CG/EM. Observou-se como componentes majorit??rios dos ??leos essenciais de P. duckei os sesquiterpenos, trans-cariofileno (29,62%), Germacreno D (15,92%) e 1H-Cicloprop[e]azuleno (19,20%) enquanto que no ??leo de P. demeraranum foram observados os monoterpenos ??-elemeno (34.50%), dllimoneno (20.56%) e os sesquiterpenos, Germacreno B (9.11%), Germacreno D (5.36%) e ??-Selineno (5.20%). Foi avaliada a atividade leishmanicida dos ??leos. A esp??cie P. duckei apresentou inibi????o de 50% dos parasitas na concentra????o de 70 ??g/mL, enquanto a esp??cie P. demeraranum apresentou DL50 = 91,51 ??g/mL. Para a cepa de L. guyanensis os ??leos apresentaram uma pronunciada atividade leishmanicida, com DL50 = 14,3 ??g/mL para P. duckei e 22,7??g/mL para P. demeraranum. Foi avaliada a toxicidade dos ??leos em c??lulas de macr??fagos retiradas da cavidade intraperitonial de camundongos; os ??leos apresentaram baixa citotoxicidade, incentivando futuros testes em formas amastigotas de Leishmania. O potencial irritante dos ??leos tamb??m foi avaliado atrav??s do m??todo HET CAM, os dados obtidos foram bastante promissores caracterizando os ??leos com moderada irrita????o cut??nea.