Detec????o do v??rus dengue em mosquitos Aedes Aegypti (linnaeus, 1762) (diptera: culicidae) e aedes albopictus (skuse 1894) (diptera: culicidae) capturados na zona urbana da cidade de Manaus, Amazonas

• Author(s): Santos, Ilia Gilmara Carvalho dos
• Date: 2015
• Origin: Oasisbr
• Subject(s): V??rus Dengue; RT-PCR; Aedes aegypti; Aedes albopictus; Dengue virus; RT-PCR; Aedes aegypti; Aedes albopictus; CI??NCIAS DA SA??DE
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese

Description

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:14:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ilia Gilmara Carvalho.pdf: 530450 bytes, checksum: 50f84ac4bf26a69a84cf2a4b2a031978 (MD5) Previous issue date: 2008-12-31

Funda????o de Amparo ?? Pesquisa do Estado do Amazonas

The study had for objective the detection and typing of the dengue virus, in the vectors Aedes aegypti and Aedes albopictus through the Polimerase Chain Reaction (PCR) using specific primers. During the period of December of 2005 to December of 2006 8984 mosquitoes were collected, of these 827 they were Aedes, being 819 Ae. aegypti (414 females and 405 males) and 8 Ae. albopictus (7 females and 1 male), in 46 neighborhoods of the city of Manaus including all of the geographical areas of the city. The females were grouped in pools from 1 to 10 mosquitoes for microtubes, in agreement with the gender, it dates from collection, neighborhood and stocked to -70C in the same day of the collection, totaling 143 pools (138 of Ae. aegypti and 5 of Ae. albopictus). Those pools were macerated in PBS containing albumin, and a bracket of the softened was removed for inoculation in cell culture, and other bracket was used to accomplish the extraction of the viral RNA. Once extracted, RNA was submitted the reaction of reverse transcription following by the chain reaction of the polimerase (RT-PCR). The positive samples in RT-PCR were submitted the reaction of semi nested PCR and the products of this reaction were resolved in agarose gel to 1,5% with et??dio bromide. Of the 143 analyzed pools, 114 (111 of Ae. aegypti and 3 of Ae. albopictus) they were positive for DENV 3, just a pool was shown positive for two sorotipos, DENV 1 and DENV 3. The prevalence pools Ae. aegypti infected with DENV 3 in the city of Manaus was of 53%, being larger in the areas Center-west (70%), South (60%) and West (53%), and smaller in the area East (23%). This is the first report of the detection of DENV 3 in field-caught Ae. albopictus naturally infected in Brazil. The monitoring of the circulation viral in mosquitoes with the use of the technique of RT-PCR allows the previous knowledge of the levels of spread viral in certain areas contributing to determine the time and place to apply the prevention measures and control.

O estudo teve por objetivo a detec????o e tipagem do v??rus dengue, nos vetores Aedes aegypti e Aedes albopictus por meio da Rea????o em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizando primers espec??ficos. Durante o per??odo de Dezembro de 2005 a Dezembro de 2006 foram coletados 8984 mosquitos, destes 827 eram Aedes, sendo 819 Ae. aegypti (414 f??meas e 405 machos) e 8 Ae. albopictus (7 f??meas e 1 macho), em 46 bairros da cidade de Manaus abrangendo todas as zonas geogr??ficas da cidade. As f??meas de Ae. aegypti e Ae. albopictus foram agrupadas em pools de 1 a 10 mosquitos por microtubos, de acordo com o g??nero, data de coleta, bairro e estocado a -700C no mesmo dia da coleta, totalizando 143 pools (138 de Ae. aegypti e 5 de Ae. albopictus). Esses pools foram macerados em PBS contendo albumina, e uma al??quota do macerado foi retirada para inocula????o em cultura de c??lula, e outra al??quota foi utilizada para realizar a extra????o do RNA viral. Uma vez extra??do, o RNA foi submetido a rea????o de transcri????o reversa seguida da rea????o em cadeia da polimerase (RT-PCR). As amostras positivas na RT-PCR foram submetidas a rea????o de Semi Nested PCR e os produtos desta rea????o foram resolvidos em gel de agarose a 1,5% corado com brometo de et??dio. Dos 143 pools analisados, 114 (111 de Ae. aegypti e 3 de Ae. albopictus) foram positivos para DENV 3, apenas um pool mostrou-se positivo para dois sorotipos, DENV 1 e DENV 3. A preval??ncia de mosquitos Ae. aegypti infectados com DENV 3 na cidade de Manaus foi de 80%. Em todas as zonas a preval??ncia foi maior que 53%, sendo maior nas zonas Centro-oeste (70%), Sul (60%) e Oeste (53%), e menor na zona Leste (23%). Este foi o primeiro achado no Brasil da identifica????o do DENV 3 em amostras de Ae. albopictus , coletados em campo na forma adulta. O monitoramento da circula????o viral em mosquitos com o uso da t??cnica de RT-PCR permite o conhecimento pr??vio dos n??veis de dissemina????o viral em determinadas ??reas contribuindo para determinar a ??poca e local para aplicar as medidas de preven????o e controle.