Imunogenicidade vacinal de prote??na recombinante constitu??da de epitopos dominantes e subdominantes de Anaplasma marginale avaliados em camundongos Balb/c

• Author(s): Cangussu, Alex Sander Rodrigues
• Date: 2016
• Origin: Oasisbr
• Subject(s): Anaplasma bovina; Vacinas recombinantes; Imunogenicidade; CI??NCIAS BIOL??GICAS: BIOTECNOLOGIA
• Document Type: Doctoral thesis
• Language: Portuguese

Description

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N??o informada

The bovine anaplasmosis is a disease characterized by severe anemia, fever, weight loss, decreased milk production, abortion and death in the animals. It is caused by A. marginale and transmitted by ticks, leading severe economic losses in cattle production and hence strategies for developing vaccines are essential to minimize its impact. In this study, a chimeric protein was produced by synthetic DNA, carrying sequences of predicted epitopes from OMP7, OMP9 and MSP1a, and used as vaccine emulsified with ISA adjuvant. After three doses, Balb/c mice were challenged with 3x105cel/mL A. marginale UFMG2 to assess proctetion of compound MSP1a/OMP7/9+ISA. There were not body weight alterations neither clinical signs were observed in immunized mice. Bacteremia count showed drastic reduction and discrete alteration on erythrocyte morphology (spherocytes) in vaccined mice 56th day after challenge. No alteration was observed in hematologic data in relation to infected control mice. The evaluation obtained in this study showed the importance of the MSP1a /OMP7/9 protein in the immune response of the Balb/c and your applicability potential in the recombinant vaccine production.

A anaplasmose bovina ?? uma enfermidade causada por uma rickettsia denominada Anaplasma marginale (A. marginale) transmitida por carrapatos e a doen??a se caracteriza por anemias, febre, perda de peso, diminui????o da produ????o de leite, aborto e morte nos animais. A doen??a causa perdas econ??micas na produ????o de gado e por isso estrat??gias para o desenvolvimento de vacinas ?? imprescind??vel para minimizar seu impacto. Neste estudo uma prote??na recombinante de A.marginale foi produzida a partir de uma estrat??gia inovadora de utilizar DNA sintetico para codificar os ep??topos dos principais ant??genos de A.marginale. Ap??s a clonagem em pGEM e subclonagem em pHT43, a prote??na quim??rica foi expressa em Escherichia coli contendo ep??topos dos antigenos OMP7/9 (outer membrane protein 7/9) e MSP1a (major surface protein 1a). A antigenicidade foi comprovada pela reatividade da proteina recombinante com soro de bezerro com anaplasmose, e a imunogenicidade e prote????o vacinal foi comprovada em camundongos Balb/c. Com uma f??rmula composta com adjuvante oleoso (MSP1a/OMP7/9+ISA), animais receberam tr??s (3) doses vacinais e desafiados com 3x105cel/mL de A. marginale UFMG2. Os animais imunizados n??o apresentaram varia????o de peso corporal nem sinais cl??nicos da doen??a, por??m houve redu????o significativa da carga bacter??mica nos vacinados (p<0,0008) comparados com grupos placebos. Al??m disso, n??o houve altera????es hematol??gicas como aumento no n??mero de mon??citos (p<0,005), neutr??filos (p<0,05) e leucocitose (p<0,05), verificadas nos controles infectados. As avalia????es deste trabalho demonstraram a import??ncia da prote??na recombinante MSP1a/OMP7/9 na melhoria da resposta imunol??gica de Balb/c e sua potencial aplicabilidade na produ????o de vacinas recombinantes.