Autor(es): Alves, Jainara Cristina dos Santos ; Wanzeller, Ana L?cia Monteiro ; Silveira, Edna da ; Alves, Ant?nia dos Santos ; Primo, Euda Galiza ; Oliveira, Darleise de Souza ; Linhares, Alexandre da Costa ; Gomes, Maria de Lourdes Contente ; Castro, Ceyla Maria Oeiras de
Data: 2018
Origem: Oasisbr
Assunto(s): Enterovirus / isolamento & purifica??o; Infec??es por Coxsackievirus / epidemiologia; Enterovirus Humano B; Rea??o em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa / m?todos
Instituto Evandro Chagas/SVS/MS e ao Programa Institucional de Inicia??o Cient?fica (PIBIC-IEC) do Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) e Funda??o Amaz?nia Paraense de Amparo ? Pesquisa (FAPESPA).
Minist?rio da Sa?de. Secretaria de Vigil?ncia em Sa?de. Instituto Evandro Chagas. Ananindeua, PA, Brasil.
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Os enterov?rus (EV) de origem humana pertencem ? fam?lia Picornaviridae, possuem 30 nm de di?metro, genoma de RNA de fita simples, sua transmiss?o ? de via fecal-oral e t?m sido relacionados a surtos de diversas doen?as do sistema nervoso central. O estudo objetivou identificar a presen?a de enterov?rus n?o p?lio (EVNP) isolados de casos de paralisia fl?cida aguda (PFA). Linhagens celulares HEp-2C e RD que apresentaram efeito citop?tico foram selecionadas para testes moleculares posteriores. O RNA viral foi extra?do utilizando-se o kit QIAamp Viral RNA. Os iniciadores 222 e 292, os quais amplificam parte da regi?o VP1 do genoma dos EV, foram usados na t?cnica de rea??o em cadeia da polimerase precedida de transcri??o reversa (RT-PCR) para a detec??o molecular viral, produzindo um amplicon de 356 nucleot?deos. Entre os anos de 1996 a 2006, 538 amostras fecais de casos suspeitos de PFA, provenientes de toda a Regi?o Norte do Brasil, foram encaminhadas ao Instituto Evandro Chagas. Deste total, 78 (14,5%; 78/538) apresentaram efeito citop?tico nas duas linhagens celulares. Posteriormente, 51 (65,4%; 51/78) foram positivas por RT-PCR. Os casos positivos de EV foram detectados nos Estados do Amazonas (14/51; 27,4%), Amap? (13/51; 25,5%), Par? (11/51; 21,6%), Rond?nia (10/51; 19,6%) e Tocantins (3/51; 5,9%). A identifica??o por sequenciamento gen?mico foi poss?vel em 40 amostras. Echov?rus (20 casos, nove sorotipos) e coxsackiev?rus (dez casos, tr?s sorotipos) foram as esp?cies predominantes encontradas. Os resultados deste estudo corroboram outros realizados no Brasil e no mundo, e servem de base para o melhor entendimento da epidemiologia molecular dos EV circulantes na Regi?o Amaz?nica e a associa??o de seus diversos sorotipos com casos de doen?as neurol?gicas.
Enteroviruses (EV) of human origin belong to the family Picornaviridae, they have 30 nm in diameter, genome of single-stranded RNA, with fecal-oral transmission and have been related to outbreaks of several diseases of the central nervous system. This study aimed to identify the presence of non-polio enteroviruses (NPEV) isolated from cases of acute flaccid paralysis (AFP). Cell lines Hep-2C and RD that presented cytopathic effect were selected for further molecular tests. The viral RNA was extracted using QIAamp Viral RNA mini kit. Primers 222 and 292, which increased part of the VP1 region of EV genome, were used in the reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) technique for molecular virus detection, producing an amplicon of 356 nucleotides. From 1996 to 2006, 538 fecal samples of AFP suspected cases from Northern Brazil were sent to the Instituto Evandro Chagas. Of this total, 78 (14.5%, 78/538) presented cytopathic effect in both cell lines. Thereafter, 51 (65.4%, 51/78) were positive by RT-PCR. EV positive cases were detected in the States of Amazonas (14/51, 27.4%), Amap? (13/51, 25.5%), Par? (11/51, 21.6%), Rond?nia (10/51, 19.6%) and Tocantins (3/51, 5.9%). Genomic sequencing identification was performed in 40 samples. Echovirus (20 cases, nine serotypes) and coxsackievirus (ten cases, three serotypes) were the predominant species found. The results of this study corroborate others conducted in Brazil and in the world, and serve as basis for better understanding about molecular epidemiology of EV circulating in the Amazon Region and its connection with several serotypes cases of neurologic diseases.
