Author(s): Carvalho, Ana Raquel Monteiro de
Date: 2021
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.5/20969
Origin: Repositório da Universidade de Lisboa
Subject(s): Ixodídeos; Carnívoros; Anaplasma; Ehrlichia; C. burnetii; Hepatozoon; Ixodids; Carnivores; Anaplasma; Ehrlichia; C. burnetii; Hepatozoon
Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária
Os ixodídeos, ectoparasitas hematófagos estritos, com distribuição geográfica mundial, são artrópodes familiares para a maioria da população, sendo vetores de variados agentes patogénicos. Os exemplares da família Ixodidae estão particularmente associados à transmissão de agentes de doenças com implicação em saúde animal e em saúde pública, estando inserido neste grupo Rhipicephalus sanguineus s.l., um ixodídeo muito associado à parasitose do canídeo doméstico. As doenças causadas por agentes transmitidos por vetores ixodídeos (DTI) apresentam um carácter emergente e encontram-se em expansão devido à globalização e facilidade de movimentação, começando a surgir casos associados a novos agentes e/ou em locais onde outrora não haviam sido ainda registados. Neste trabalho pretendeu-se caracterizar a população ixodológica recolhida de animais de companhia em quatro concelhos do distrito de Setúbal, recorrendo à identificação morfológica e molecular, bem como à investigação de agentes patogénicos com interesse veterinário e em saúde pública com recurso a cPCR (para deteção de Anaplasma/Ehrlichia spp., Babesia/Theileria spp. e Hepatozoon spp.) e qPCR (para deteção de Coxiella burnetii). Para tal, foram recolhidos 180 ixodídeos (71 fêmeas, 49 machos, 52 ninfas e 8 larvas) a parasitar 31 animais (30 cães e 1 gato) que se apresentaram à consulta entre abril e agosto de 2019. Aos tutores desses animais foi ainda aplicado um inquérito epidemiológico. Relativamente às espécies de ixodídeos, 97% (174/180) dos exemplares foram identificados como R. sanguineus s.l., 2% (4/180) como R. pusillus e 1% (2/180) como I. ricinus. Foi extraído o DNA a 67% (121/180) dos ixodídeos pelo método de hidrólise em solução de amónia e a pesquisa de agentes patogénicos revelou positividade em 5,0% (6/121) das amostras para Anaplasma/Ehrlichia spp., 2,5% (3/121) para C. burnetii e 1,7% (2/121) para Hepatozoon spp. A confirmação por sequenciação foi conseguida para 3 dos 6 ixodídeos positivos para Anaplasma/Ehrlichia spp., tendo sido obtida uma sequência 100% homóloga a sequências de Anaplasma platys existentes no GenBank (KX359180). A presença de C. burnetii foi confirmada em 2 dos 3 ixodídeos positivos, utilizando novo alvo molecular e/ou sequenciação. As espécies de ixodídeos identificadas estão de acordo com o descrito para as regiões mencionadas. Dos agentes testados, salienta-se a presença de A. platys e C. burnetii, bactérias responsáveis por desencadear trombocitopénia cíclica canina e febre Q, respetivamente, sendo esta última uma doença de caráter zoonótico. Ambos os agentes podem manter-se latentes nos hospedeiros por períodos prolongados, dando origem a infeções crónicas com sinais clínicos inespecíficos.
ABSTRACT - Morphological and Molecular identification of ixodids and its zoonotic potential in the Public Health field - The ixodids, strict hematophagous ectoparasites, with worldwide geographical distribution, are familiar arthropods for the majority of the population. They are considered vectors of human and animal infectious diseases around the world and the Ixodidae family is the one with most medical significance, particularly associated with the transmission of disease agents with implications for animal and public health. Within Ixodidae family is Rhipicephalus sanguineus s.l, the brown dog tick. Tick-borne diseases (TBD) are now emergent and re-emergent due to increased global movement of animals and people and have started to expand their distribution to both non-endemic and endemic areas in the globe. This work aimed to characterise the ixodological population collected from companion animals in four councils of Setubal district, using morphological and molecular identification, as well as the investigation of pathogens with veterinary and public health interest using cPCR (for detection Anaplasma/Ehrlichia spp., Babesia/Theileria spp. and Hepatozoon spp.) and qPCR (for Coxiella burnetii detection). For this purpose, a total of 180 feeding ticks (71 females, 49 males, 52 nymphs and 8 larvae) were collected from 31 animals (30 dogs and 1 cat) that came for consultation in veterinary clinics between April and August 2019. To the pet owners was also applied an epidemiological inquiry. Regarding the species of ixodids, 97% (174/180) of the specimens were identified as R. sanguineus s.l, 2% (4/180) as R. pusillus and 1% (2/180) as I. ricinus. 67% (121/180) of the ixodids DNA was extracted using the hydrolised amonium method and the search for pathogens revealed positivity in 5,0% (6/121) of the samples for Anaplasma/Ehrlichia spp., 2,5% (3/121) for C. burnetii and 1,7% (2/121) for Hepatozoon spp. The identity confirmation through sequencing was obtained to 3 of 6 positive ixodids to Anaplasma/Ehrlichia spp. and the final sequence was 100% homologous with Anaplasma platys sequences already existing in GenBank (KX359180). The DNA of C. burnetii was confirmed in 2 of 3 positive ixodids using a new molecular target and/or sequencing. The species of ixodids identified are in accordance with that described for the mentioned regions. Of the agents tested, the presence of A. platys and C. burnetii, bacteria responsible for triggering canine cyclic thrombocytopenia and Q fever, respectively, stands out, the latter being a zoonotic disease. Both agents can remain latent in the hosts for prolonged periods, giving rise to chronic infections with nonspecific clinical signs.
