Autor(es): Abreu, Gabriel Ferreira
Data: 2023
Identificador Persistente: https://hdl.handle.net/1822/84093
Origem: RepositóriUM - Universidade do Minho
Assunto(s): Adjuvantes; Biofilmes; Infecções das vias respiratórias inferiores; Terapia combinatória; Adjuvants; Biofilms; Combinatorial therapy; Lower respiratory tract infections
As infecções das vias respiratórias inferiores (IVRI) são uma causa comum de mortalidade/morbilidade em todo o mundo. As IVRI são frequentemente governadas por biofilmes, tipicamente polimicrobianos e na sua maioria dominadas por espécies bacterianas Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Acinetobacter baumannii, Klebsiella pneumoniae), mas também por fungos (por exemplo, Candida albicans). Os biofilmes contribuem significativamente para o aparecimento de resistência antimicrobiana (RAM), o que é de grande preocupação clínica. A ineficácia dos antibióticos e a falta de novos antibióticos exige fortemente estratégias alternativas que possam restabelecer a acção dos antibióticos existentes contra os agentes patogénicos. O principal objectivo deste trabalho foi o de encontrar estratégias combinatórias eficazes de antibiótico-adjuvante capazes de atenuar os traços de RAM nos agentes patogénicos associados ao IVRI, isolados e em co-infecção. Em primeiro lugar, a susceptibilidade das populações microbianas foi avaliada em relação a um painel de compostos, incluindo antibióticos e potenciais compostos adjuvantes (PCAs). Os antibióticos ineficazes foram testados em combinação com todos os PCAs e verificados quanto à sinergia através de um checkboard assay. As combinações antibiótico-adjuvante mais promissoras foram então empregadas contra biofilmes pré-estabelecidos 24 h de uma única espécie, de dupla (P. aeruginosa/S. aureus) e tripla espécie (P. aeruginosa/S. aureus/K. pneumoniae) para avaliar a sua eficácia. A maioria das populações microbianas mostrou resistência à maioria dos antibióticos (12 em 25). Não foi encontrada actividade antimicrobiana para os 4 AAE testados (EDTA, SucA, FAR, LIN). Foram encontradas combinações sinergéticas contra S. aureus, K. pneumoniae e A. baumannii, conforme determinado pelo índice FIC. EDTA e LIN mostraram os melhores resultados ao interagirem com sucesso com todos os antibióticos que anteriormente tinham sido considerados ineficazes. As combinações antibiótico-adjuvante de PIP+EDTA, PIP+COL, COL+EDTA, e COL+LIN foram testadas contra biofilmes de uma e várias espécies. Todas as combinações testadas levaram a reduções significativas na biomassa do biofilme de P. aeruginosa e S. aureus; reduções igualmente visíveis no número de células foram também obtidas nos biofilmes formados por cada espécie. No entanto, não foi observada qualquer redução significativa na massa do biofilme de K. pneumoniae e A. baumannii, mas houve uma diminuição nas células cultiváveis. As combinações antibiótico-adjuvantes contra biofilmes de dupla espécie resultaram em reduções significativas na biomassa do biofilme e nas células cultiváveis de P. aeruginosa. Quanto aos biofilmes tri-espécies, a única redução significativa na massa dos biofilmes foi encontrada quando foram utilizadas combinações de COL. Contudo, nenhuma combinação foi capaz de erradicar completamente as populações de biofilmes.
