A simple PCR-based procedure for plaque diagnosis

• Author(s): Leal, Nilma Cintra ; Abath, Frederico Guilherme Coutinho ; Alves, Luis Carlos ; Almeida, Alzira Maria Paiva de
• Date: 1996
• Origin: Oasisbr
• Subject(s): Plague; Yersinia pestis; Rodents; PCR; Diagnosis
• Document Type: Journal article
• Language: English

Description

Supernatant of boiled spleen saline-suspensions of Yersinia pestis experimentally infected animals were used as template for PCR amplification without DNA extraction. PCR sensitivity was enhanced by a second round of amplification (Nested). No amplification was observed from non-infected animals.

Triturados de baços de animais infectados experimentalmente com Y. pestis, suspensos em salina foram fervidos e os sobrenadantes usados diretamente para amplificação do PCR sem prévia extração do DNA. O limiar de detecção poda ser aumentado por uma segunda etapa de amplificação (Nested-PCR). Não houve amplificação a partir das amostras dos animais não infectados usados como controle.