Molecular characterization of Dengue viruses type 1 and 2 isolated from a concurrent human infection

• Autor(es): Santos, Cecília Luiza Simões dos ; Bastos, Mariana Aparecida Antunes ; Sallum, Maria Anice Mureb ; Rocco, Iray Maria
• Data: 2003
• Origem: Oasisbr
• Assunto(s): Dengue virus; Dual infection; RT/PCR; E/NS1 gene sequences; Phylogenetic analysis
• Tipo de Documento: Artigo científico
• Idioma: Inglês

Descrição

In 2001, an autochthonous case of dual viremia, resulting from naturally acquired dengue virus DEN-1 and DEN-2 infections was detected during the dengue outbreak that occurred in Barretos, a city with about 105,000 inhabitants in the North region of São Paulo State. Serotype identification was based on virus isolation to C6/36 mosquito cells culture and immunofluorescence assays using type-specific monoclonal antibodies. The double infection was also confirmed by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). Comparative analysis of the 240-nucleotide sequences of E/NS1 gene junction region between the genome of DEN-1 and DEN-2 isolates of the corresponding reference Nauru and PR 159S1 strains, respectively, showed some nucleotide differences, mainly silent mutations in the third codon position. Results of maximum likelihood phylogenetic analysis of E/NS1 gene sequences indicated that both genotypes of DEN-1 and DEN-2 viruses recovered from double infection in Barretos belonged to genotypes I and III, respectively.

A cidade de Barretos, com cerca de 105.000 habitantes e situada na região norte do Estado de São Paulo, apresentou, no ano de 2001, importante epidemia de dengue causada por vírus dengue de sorotipos 1 e 2. Nesta epidemia foi detectado um caso de dupla infecção viral em um paciente acometido pela forma clássica da doença. Os vírus foram isolados em cultura de células C6/36 e identificados como vírus dengue 1 e 2 por reações de imunofluorescência e RT-PCR. A análise molecular por seqüenciamento de nucleotídeos da junção dos genes E/NS1 dos vírus em estudo mostrou a presença de regiões bem conservadas quando comparados aos vírus protótipos, observando-se algumas alterações nucleotídicas que em sua maioria originaram mutações silenciosas. Resultados da análise de verossimilhança máxima para a inferência filogenética das seqüências E/NS1 indicaram que os vírus dengue 1 e 2 isolados do paciente pertencem aos genótipos I e III respectivamente.