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Análise de biomassa e ácidos nucléicos na cinética de formação de biofilme de trichosporon Inkin e t. Asahii

Author(s): Pereira, Lívia Maria Galdino ; Pereira, Lívia Maria Galdino ; Evangelista, Antonio José de Jesus ; Sousa, José Kleybson de ; Serpa, Rosana ; Cordeiro, Rossana de Aguiar

Date: 2019

Origin: Oasisbr

Subject(s): Biofilme; Trichosporon; Ácidos nucleicos


Description

Em pacientes com doenças hematológicas graves, fungos do gênero Trichosporon podem causar infecções disseminadas graves podendo evoluir ao óbito. Geralmente, estas infecções estão associadas à formação biofilmes em dispositivos hospitalares. Estudos relatam que os ácidos nucléicos na matriz extracelular de biofilmes formados por patógenos fúngicos relacionam-se com o aumento da biomassa dessas comunidades. Porém, pouco se sabe sobre a contribuição dessas moléculas para a estrutura e funcionamento dos biofilmes de Trichosporon. Investigamos a formação de biofilmes e produção de ácidos nucleicos presentes no sobrenadante e na matriz extracelular de biofilmes formados por cepas clínicas de T. inkin (n=1) e T. asahii (n=1), e sua relação com aumento da biomassa presente nessas estruturas. Biofilmes foram formados em meio RPMI a 35ºC e após incubação por 6, 24, 48, 72, 96 e 168h, os sobrenadantes eram aspirados e os biofilmes eram removidos dos poços para análises. A concentração de ácidos nucléicos foi estimada a partir de leitura de absorbância a 260nm; a biomassa foi estimada por reação de cristal violeta e posterior análise de absorbância a 540nm. Os resultados mostraram que o aumento da produção de ácidos nucleicos de ambas as espécies se deu após 48h, tanto para sobrenadante como para matriz, quando o biofilme se encontra maduro. Em 72h a quantidade de ácidos nucleicos na matriz extracelular foi maior do que no sobrenadante, já em 96h houve um pico de concentração equivalente nas condições das duas cepas, mantendo-se constante nas próximas horas. A análise de biomassa alcançou valores de absorbância máximos após 24h de formação do biofilme, os quais se mantiveram constantes ao longo dos tempos de análise. Assim, podemos relacionar que a produção de ácidos nucleicos favoreceu o aumento da biomassa antes da maturação completa do biofilme no tempo de 48h. Faz-se necessário estudos mais detalhados para analisar a influência dessa molécula na formação do biofilme.

Document Type Other
Language Portuguese
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