Author(s): Silva, Joana Rita Castanheira Alexandre Pinheiro da
Date: 2012
Persistent ID: http://hdl.handle.net/10773/10228
Origin: RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro
Subject(s): Biologia molecular; Trombose; Anticoagulantes; Proteínas; Doenças genéticas
A proteína C (PC) é um dos inibidores fisiológicos mais importantes da coagulação sanguínea. A natureza multifactorial da trombose venosa, além dos factores de risco adquiridos, tem uma forte componente hereditária. A deficiência congénita de PC induz um estado de hipercoagulabilidade, que a torna num dos principais factores de risco de tromboembolismo venoso. Embora rara, a ocorrência de manifestações trombóticas severas no período neonatal, associados a homozigotia ou heterozigotia composta, demonstra a importância da actividade anticoagulante da PC. Os níveis plasmáticos de PC nem sempre são esclarecedores, uma vez que há indivíduos com deficiência que apresentam um intervalo de valores sobreponíveis aos dos indivíduos normais. Nestes casos, apenas pelo estudo molecular do gene da PC (PROC) é possível confirmar a deficiência. Nesta dissertação, foi efectuado o estudo do gene PROC, num grupo de indivíduos pertencentes a famílias com défice de PC e com história clínica e/ou familiar de tromboembolismo venoso. Como objectivo principal, pretendeu-se efectuar uma correlação genótipo/fenótipo em famílias com história de trombose venosa e níveis plasmáticos de PC persistentemente baixos (ou próximo do valor de limite da normalidade). Para tal, relacionaram-se as mutações encontradas no gene PROC e os haplótipos CGT e TAA em homozigotia dos polimorfismos da região promotora -1654C>T, -1641A>G, -1479A>T, com os níveis plasmáticos de PC. Foram encontradas sete mutações diferentes, previamente descritas: -13A>G; g.595 C>T; g.633_634delGC; g.629C>T; g.659G>A; g.715G>A; g.1015G>A. O estudo molecular confirmou défices em caso de suspeita e, consoante o tipo e localização da mutação permitiu inferir o fenótipo. A identificação de mutações no gene PROC não revelou valor prognóstico. No entanto, se for efectuada no âmbito de estudos familiares, pode ser útil para decidir profilaxia em situações de risco, e ainda possibilita o diagnóstico pré-natal nos casos mais severos. O estudo molecular de alterações no gene PROC, e o seu efeito, é também muito importante na medida em que contribui para o esclarecimento da estrutura e funções da PC. Futuramente, pretender-se-ia melhorar o conhecimento da função da PC, quando diminuída, como factor de risco para trombose, e tornar a identificação de portadores de mutações no gene PROC, um estudo complementar de rotina nos laboratórios de diagnóstico.
Protein C (PC) is one of the most important physiological inhibitors of blood coagulation. The multifactorial nature of venous thrombosis counts with a strong hereditary predisposition, besides the adquired risk factors. The congenital PC deficiency leads to a state of hypercoagulability, and that’s why it is considered one of the most important venous thrombosis risk factors. Although, this situation is rare, the occurrence of severe thromboembolic episodes associated with homozygotes and compound heterozygotes individuals, during the neonatal period, illustrates the importance of the anticoagulant property of PC. The PC plasma levels not always are helpful, because the levels of a PC deficient individual may overlap with those of normal ones. In these cases, only the molecular study of the PC gene (PROC) can confirm the deficiency. It was studied the PROC gene of a group of individuals from PC deficient families and with personal and/or family venous thrombosis history. The main objective of this dissertation consists in genotype/phenotype correlation within families with history of venous thrombosis and repeated low plasma levels of PC (or with borderline values). For this purpose, it was evaluated the relationship between the mutations found in PROC gene and CGT and TAA homozygous haplotypes, of -1654C>T, - 1641A>G, -1479A>T promoter polimorphisms, and plasma leves of PC. It was identified seven different mutations, previously described: -13A>G; g.595 C>T; g.633_634delGC; g.629C>T; g.659G>A; g.715G>A; g.1015G>A. The molecular study confirmed those doubtful cases, and allowed the deduction of phenotype, according to the type and local of mutations. The identification of PROC gene mutations didn’t show prognostic value. However, in family studies context, it can be useful to implement prophylaxis, and to offer the prenatal diagnosis, in severe cases. The study of PROC gene and the effect of mutations also contributes for the knowledge of structure and function of PC. Hereafter, it would be important to set up a rotine molecular study in diagnostic laboratories, hoping it would improve the understanding of PC function in coagulation mechanisms and thrombotic tendency.
