Cultura de tecidos de Hypericum foliosum e análise de genes associados à biossíntese de hipericinas

• Author(s): Borba, Ana Rita Andrade
• Date: 2011
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10362/6589
• Origin: Repositório Institucional da UNL
• Subject(s): Hypericum foliosum; Cultura de tecidos; TIS; Expressão génica; hyp-1; HpPKS2
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese
• Advisor(s): Machado, Artur; Mendonça, Duarte
• Contributor(s): RUN

Description

Tese apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para a obtenção do grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina

O género Hypericum caracteriza-se pela ocorrência de compostos biologicamente activos com grande importância farmacêutica, nomeadamente as hipericinas. Nos Açores o potencial de plantas endémicas com interesse biotecnológico, como o pequeno arbusto Hypericum foliosum Aiton, é em parte desconhecido. Com o presente estudo pretendeu-se estabelecer e optimizar culturas celulares de H. foliosum em diferentes sistemas de cultura in vitro e analisar a expressão dos genes hyp-1 e HpPKS2, associados à biossíntese de hipericinas, em folhas de plantas in vivo e in vitro, bem como em culturas em suspensão e em culturas celulares estabelecidas nos TIS. Neste estudo descreve-se, pela primeira vez, o TIS como um sistema biotecnológico eficiente na produção optimizada e automatizada de H. foliosum, através da indução da organogénese indirecta de raízes adventícias e da embriogénese somática indirecta. As sequências dos fragmentos estudados dos genes hyp-1 e HpPKS2 de H. foliosum partilham valores de similaridade elevados com as depositadas na base de dados GenBank® para os mesmos genes e género. Contudo, foram encontradas mutações missense e frameshift na sequência de HpPKS2 de H. foliosum que sugerem diferenças significativas relativamente à proteína de H. perforatum (EF186676). O nível máximo de expressão do gene hyp-1 foi detectado nas culturas de calos que induziram a regeneração indirectade raízes adventícias, estabelecidas nos sistemas TIS.