Document details

Development and optimization of a microRNA purification technology by affinity chromatography, using the concept of QbD

Author(s): Afonso, Adriana Alexandra Fernandes

Date: 2013

Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.6/2772

Origin: uBibliorum

Subject(s): Cromatografia de afinidade; Matrix O-phospho-L-tyrosine


Description

Atualmente, mais de 30 milhões de pessoas sofrem de demência em todo o mundo e, sem tratamento visível num futuro próximo, os números tendem a aumentar rapidamente. De todas as doenças neurodegenerativas, a doença de Alzheimer (DA) é a mais predominante. Na Doença de Alzheimer há uma perda neuronal e sináptica generalizada que causa um declínio progressivo na memória e em outras funções cognitivas, conduzindo finalmente à demência. Esta doença neurodegenerativa está associada a dois tipos de depósitos proteicos, placas extracelulares β-amilóides (Aβ) e complexos neurofibrilares intraneuronais. Estudos recentes demonstraram que o cluster miR-29 pode diminuir a deposição das placas de Aβ atuando diretamente sobre a enzima que cliva os péptidos β-amilóides (BACE-1), a qual é responsável pela clivagem da proteína precursora e, consequentemente geração de espécies Aβ tóxicas. Estes estudos apresentam a possibilidade da utilização do pré-miR-29 como um novo alvo terapêutico no tratamento da DA, para qual é necessário garantir um elevado grau de pureza, estabilidade e integridade do miRNA. Assim, o principal objetivo deste estudo é o desenvolvimento de uma nova estratégia de cromatografia de afinidade com uma matriz Ofosfo-L-tirosina comparando duas metodologias diferentes – o desenho experimental e o método “tentativa/erro” - para obter o pré-miR29 com elevado grau de pureza e rendimento, visando a sua aplicação em terapia génica.

Document Type Master thesis
Language Portuguese
Advisor(s) Sousa, Fani Pereira de; Sousa, Ângela Maria Almeida de
Contributor(s) Afonso, Adriana Alexandra Fernandes
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