Avaliação da função de DII4 na neoangiogénese tumoral e fisiológica

• Author(s): Badenes, Marina Martins
• Date: 2009
• Persistent ID: http://hdl.handle.net/10400.5/2585
• Origin: Repositório da UTL
• Subject(s): Dll4; Cicatrização; Terapia anti-Dll4; EphB4; RIP1-Tag2; Tumoral; Wound healing; Anti-Dll4 therapy; Tumor
• Document Type: Bachelor thesis
• Language: Portuguese
• Advisor(s): Duarte, António José de Freitas
• Contributor(s): Repositório da Universidade de Lisboa

Description

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária

O ligando Delta-like 4 (Dll4), através da via de sinalização Notch, é um potente regulador da angiogénese, sendo expresso na componente arterial da vasculatura. Nos adultos, a sua expressão encontra-se aumentada numa grande variedade de condições patológicas. Neste estágio avaliou-se a regeneração de feridas em murganhos com perda-de-função condicional para Dll4 (Dll4-/-). A mutação Dll4-/- determina um aumento da densidade vascular, mas devido à fraca maturação dos vasos neoformados estes não são totalmente funcionais, têm fraca perfusão e elevada extravasação. Esta experiência inseriu-se num estudo mais alargado, que teve como objectivo determinar a quantidade ideal de inibição da expressão deste gene que resulte num aumento da vascularização sem diminuição de funcionalidade, de modo a tornar a terapia útil em situações que dependam da restauração da função vascular. A primeira área onde a terapia anti-Dll4 se revela promissora é na oncologia. Neste estágio efectuaram-se ensaios terapêuticos com proteína solúvel Dll4, proteína solúvel EphB4 e combinação de ambas, usando como modelo murganhos transgénicos que desenvolvem insulinomas autonomamente, nomeadamente murganhos nos quais, sob o controlo do promotor 1 do gene de insulina II de ratazana, o antigénio tumoral grande do vírus de símio 40 é expresso apenas nas células β das ilhotas de Langerhans do pâncreas (RIP1-Tag2). Os resultados indicaram que ambas as terapias conduzem a uma redução significativa do desenvolvimento tumoral, tendo o efeito mais pronunciado sido obtido mediante a administração combinada das proteínas Dll4 e EphB4.

ABSTRACT - Delta-like ligand 4 (Dll4), an arterial-specific component of the Notch pathway, is a potent regulator of angiogenesis. In adults, the expression of this gene is increased in a variety of pathological conditions. In this internship, we assessed wounds in inducible conditional knock-out mice, Dll4lox/loxFlp-/-Cre+/-. Deletion of Dll4 results in higher vascular density, but due to weak maturation the new vessels are poorly functional with low perfusion and high extravasation. This experiment is included in a larger trial aiming to determine the concentrations at which the Dll4-blocking therapy is capable of inducing an increase in vascularization without decreasing its functionality, making it useful in pathological condition that are dependant on vascular function. Oncology was the first area where anti-Dll4 therapy revealed a promising future. In this internship therapeutic assays were carried out with soluble Dll4 protein, soluble EphB4 protein and combination of both proteins in RIP1-Tag2 transgenic mice, which develop autochthonous insulinomas by the action of simian virus 40 large tumoral antigen (Tag2), which is expressed under the control of the rat insulin II gene promoter 1 (RIP1). Tumor development was largely reduced in all experimental groups with the best results obtained in the group treated with a combination of both proteins.