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A seleção de genótipos tolerantes ao déficit hídrico pode beneficiar a culturado tomateiro favorecendo maiores produtividades. O objetivo do trabalho foi avaliar apotencialidade de solução osmótica de manitol como simulador de deficiência hídrica paraseleção de genótipos de tomateiro. Adotou-se o delineamento inteiramente casualizado (DIC)com quatro repetições. Avaliou-se a melhor concentração de manitol capaz de identificar doisgenótipos contrastantes (acesso selvagem LA-716, pertencente a espécie Solanum pennelliie cv. Santa Clara) tolerante e suscetível ao estresse hídrico, respectivamente. O potencialosmótico de -0,3 MPa obtido a partir da utilização de 22,29 g L-1 de manitol apresentoumaior eficiência para seleção de genótipos do tomateiro. Esta concentração foi utilizada paraseleção em sete genótipos segregantes F2RC1, provenientes de cruzamento interespecífico(S. pennellii versus S. lycopersicum) comparando com a testemunha resistente, acessoselvagem LA-716 e suscetível, cv. Santa Clara. O genótipo UFU80 - F2RC1#1 se destacouentre os demais, sendo superior em relação à testemunha suscetível ao déficit hídrico.O potencial osmótico de -0,3 MPa obtido por manitol foi eficiente na seleção indireta degenótipos segregantes de tomateiro tolerantes ao déficit hídrico.