Author(s):
Daniel Tulio Alves Gontijo
Date: 2019
Persistent ID: http://hdl.handle.net/1843/NCFA-6LKKJG
Origin: Oasisbr
Subject(s): Inbidores da tripsina; 4-nitrobenzamidina; Caracterização cinética; Calicreína tecidual do rato; 4-aminobenzamidina; Benzmidina; Bioquímica; Inibidores enzimáticos; Farmácia; Inbidores da tripsina; Inbidores da tripsina; 4-nitrobenzamidina; 4-nitrobenzamidina; Caracterização cinética; Caracterização cinética; Calicreína tecidual do rato; Calicreína tecidual do rato; 4-aminobenzamidina; 4-aminobenzamidina; Benzmidina; Benzmidina; Bioquímica; Bioquímica; Inibidores enzimáticos; Inibidores enzimáticos; Farmácia; Farmácia
Description
O presente estudo consiste em purificar e determinar as características cinéticas da calicreína tecidual do rato (rK1), para futuramente formular inibidores enzimáticos seletivos para as calicreínas humanas. A princípio sintetizou-se e caracterizou-se o composto 4-nitrobenzamidina. A seguir, purificou-se a rK1, pelas etapas: DEAE-Sepharose (cromatografia de troca iônica) e Sepharose-aprotinina (cromatografia de afinidade). O peso molecular e a pureza da rK1 foram determinados por cromatografia em coluna de Superose 12 HR em equipamento FPLC. Os estudos da cinética da calicreína tecidual do rato rK1 com o substrato Bz-Arg-Nan na ausência e na presença da benzamidina, 4- aminobenzamidina e 4-nitrobenzamidina indicaram que a BzA é um inibidor competitivo enquanto que a ABzA e NBzA parecem ser inibidores do tipo misto
The present study is to purify and determine the kineticcharacteristics of the tissue calicreína mouse (rK1) to further developselective enzyme inhibitors for human calicreínas. The principle issummed up and characterized the compound 4-nitrobenzamidina. Next,purified to rK1 by steps: DEAE-Sepharose (ion-exchangechromatography) and aprotinin-Sepharose (affinity chromatography). Themolecular weight and purity of rK1 were determined by chromatographyon a column of Superose 12 HR FPLC equipment.Studies of kinetics of tissue calicreína mouse rK1 with the substrate Bz-Arg-Nan in the absence and presence of benzamidina, 4-aminobenzamidina and 4-nitrobenzamidina indicated that BzA is acompetitive inhibitor while ABzA and NBzA inhibitors appear to bemixed-type
