Publicação

Investigação dos biofilmes microbianos em cateteres de diálise peritoneal

Detalhes bibliográficos
Resumo:	A diálise peritoneal (DP) é um dos tratamentos disponíveis para a insuficiência renal crónica. Esta técnica permite a remoção de substâncias tóxicas e de fluidos em excesso do sangue, através do peritoneu, usando uma solução que é introduzida na cavidade peritoneal por via de um cateter. Apesar de apresentar várias vantagens em relação à hemodiálise, um dos principais problemas associados à DP são as infeções. Embora existam na literatura vários estudos relativos à análise microbiológica de amostras de efluentes e do orifício de saída, a investigação relativa aos biofilmes em cateteres de DP é escassa. Contudo, foi sugerido que a presença de biofilme no cateter está associada a peritonites recorrentes, recidivantes e repetitivas. Desta forma, o principal objetivo do trabalho desenvolvido no âmbito desta dissertação consistiu no estudo microbiológico de biofilmes associados a cateteres de DP. Complementarmente, foram avaliadas as metodologias de análise microbiológica dos diferentes elementos cateteres de DP (extensores, segmento externo, cuffs e segmento intraperitoneal), usando cateteres de hemodiálise e cateteres contaminados in vitro. Adicionalmente, foi efetuada a avaliação dos agentes patogénicos associados a peritonites e infeções do orifício de saída (IOS). A análise das diferentes amostras de DP envolveu a execução de métodos de cultura qualitativos e (semi-) quantitativos e a identificação dos microrganismos isolados, utilizando meios seletivos e diferenciais e Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS). Neste estudo foram analisados 55 extensores, 10 cateteres permanentes de DP, 6 amostras de efluente e 3 do orifício de saída. Da análise efetuada aos cateteres verificou-se que na maior parte das amostras a densidade celular dos extensores e dos segmentos externos foi inferior a 300 UFC/extensor e inferior a 3000 UFC/segmento, respetivamente. Nos cuffs, em geral, a densidade celular foi inferior a 15000 UFC/cuff, no entanto, para uma percentagem significativa de amostras foi superior a 15000 UFC/cuff. Na maioria dos segmentos intraperitoneais, a densidade celular foi inferior ao limite de deteção (100 UFC/segmento). Portanto, em geral foi observada maior densidade celular nos cuffs do que nos restantes segmentos dos cateteres. Em concordância, a densidade celular nas amostras do orifício de saída foi superior a 15000 UFC/zaragatoa e na maioria dos efluentes foi entre 1 e 14 UFC/mL. Todos os microrganismos identificados por MALDI-TOF MS nos cateteres, peritonites e IOS pertencem ao domínio Bacteria. As bactérias Gram-positivas foram as mais frequentemente encontradas. No caso dos cateteres, as bactérias Staphylococcus coagulase-negativas, especificamente Staphylococcus epidermidis, e Pseudomonas aeruginosa foram as maioritariamente identificadas entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, respetivamente. Contudo, foram identificadas espécies não associadas a cateteres de DP até à data, tais como Sphingomonas, Delftia acidovorans e Herbaspirillum huttiense. No caso dos efluentes e das zaragatoas, foram maioritariamente identificadas espécies do género Staphylococcus. Contudo, 42% dos isolados de extensores, 32% dos isolados de cateteres permanentes e 25% dos isolados do orifício de saída não foram identificados por MALDI-TOF MS. Em conclusão, este trabalho permitiu mostrar a importância das bactérias Grampositivas na colonização de cateteres de DP e nas infeções.
Autores principais:	Machado, Diana Sofia Rodrigues
Ano:	2012
País:	Portugal
Tipo de documento:	dissertação de mestrado
Tipo de acesso:	acesso aberto
Instituição associada:	Universidade do Minho
Idioma:	português
Origem:	RepositóriUM - Universidade do Minho

Descrição
Resumo:	A diálise peritoneal (DP) é um dos tratamentos disponíveis para a insuficiência renal crónica. Esta técnica permite a remoção de substâncias tóxicas e de fluidos em excesso do sangue, através do peritoneu, usando uma solução que é introduzida na cavidade peritoneal por via de um cateter. Apesar de apresentar várias vantagens em relação à hemodiálise, um dos principais problemas associados à DP são as infeções. Embora existam na literatura vários estudos relativos à análise microbiológica de amostras de efluentes e do orifício de saída, a investigação relativa aos biofilmes em cateteres de DP é escassa. Contudo, foi sugerido que a presença de biofilme no cateter está associada a peritonites recorrentes, recidivantes e repetitivas. Desta forma, o principal objetivo do trabalho desenvolvido no âmbito desta dissertação consistiu no estudo microbiológico de biofilmes associados a cateteres de DP. Complementarmente, foram avaliadas as metodologias de análise microbiológica dos diferentes elementos cateteres de DP (extensores, segmento externo, cuffs e segmento intraperitoneal), usando cateteres de hemodiálise e cateteres contaminados in vitro. Adicionalmente, foi efetuada a avaliação dos agentes patogénicos associados a peritonites e infeções do orifício de saída (IOS). A análise das diferentes amostras de DP envolveu a execução de métodos de cultura qualitativos e (semi-) quantitativos e a identificação dos microrganismos isolados, utilizando meios seletivos e diferenciais e Matrix Assisted Laser Desorption Ionization-Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS). Neste estudo foram analisados 55 extensores, 10 cateteres permanentes de DP, 6 amostras de efluente e 3 do orifício de saída. Da análise efetuada aos cateteres verificou-se que na maior parte das amostras a densidade celular dos extensores e dos segmentos externos foi inferior a 300 UFC/extensor e inferior a 3000 UFC/segmento, respetivamente. Nos cuffs, em geral, a densidade celular foi inferior a 15000 UFC/cuff, no entanto, para uma percentagem significativa de amostras foi superior a 15000 UFC/cuff. Na maioria dos segmentos intraperitoneais, a densidade celular foi inferior ao limite de deteção (100 UFC/segmento). Portanto, em geral foi observada maior densidade celular nos cuffs do que nos restantes segmentos dos cateteres. Em concordância, a densidade celular nas amostras do orifício de saída foi superior a 15000 UFC/zaragatoa e na maioria dos efluentes foi entre 1 e 14 UFC/mL. Todos os microrganismos identificados por MALDI-TOF MS nos cateteres, peritonites e IOS pertencem ao domínio Bacteria. As bactérias Gram-positivas foram as mais frequentemente encontradas. No caso dos cateteres, as bactérias Staphylococcus coagulase-negativas, especificamente Staphylococcus epidermidis, e Pseudomonas aeruginosa foram as maioritariamente identificadas entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, respetivamente. Contudo, foram identificadas espécies não associadas a cateteres de DP até à data, tais como Sphingomonas, Delftia acidovorans e Herbaspirillum huttiense. No caso dos efluentes e das zaragatoas, foram maioritariamente identificadas espécies do género Staphylococcus. Contudo, 42% dos isolados de extensores, 32% dos isolados de cateteres permanentes e 25% dos isolados do orifício de saída não foram identificados por MALDI-TOF MS. Em conclusão, este trabalho permitiu mostrar a importância das bactérias Grampositivas na colonização de cateteres de DP e nas infeções.