Publicação
The role of codY and pdhA in S. epidermidis biofilms, VBNC cells formation and virulence
| Resumo: | Staphylococcus epidermidis, uma bácteria comensal que habita na pele e mucosas humanas saudáveis, é uma das principais causas de infeções associadas aos cuidados de saúde. A capacidade de S. epidermidis formar biofilmes em dispositivos médicos é o seu principal fator de virulência, o que contribui para a redução da eficiência dos antibióticos, evasão à resposta do sistema imunitário do hospedeiro e para a recorrência das infeções. Os biofilmes bacterianos apresentam diferentes subpopulações tal como as células viáveis mas não cultiváveis (VNC), que são conhecidas por surgirem em condições ambientais adversas. CodY, um regulador da transcrição, foi previamente reconhecido como um repressor da expressão de centenas de genes em diferentes espécies bacterianas sob condições desfavoráveis. Ainda, através de uma análise de imunoproteómica, o CodY foi identificado como um potencial fator na indução de células VNC em biofilmes formados por S. epidermidis. Considerando estes factos, construímos e caracterizamos uma estirpe mutante, sem o gene codY, para determinar o seu papel na indução do estado VNC e noutros fatores de virulência. O primeiro ensaio experimental foi focado na validação de um modelo de indução da formação de células VNC in vitro previamente desenvolvido. É importante salientar que também demonstramos a formação de células VNC em populações planctónicas, seguindo o mesmo mecanismo de indução utilizado em biofilmes. Em relação à caracterização da estirpe mutante, esta apresentou uma taxa de crescimento e de capacidade de formação de biofilme reduzidas em comparação com a estirpe selvagem. Sob condições indutoras do estado VNC, foi observado um maior número de células cultiváveis em biofilmes formados pela estirpe mutante. Adicionalmente, avaliamos o impacto da deleção do gene codY na capacidade da bactéria sobreviver no sangue e plasma humano, e na sua susceptibilidade a antibióticos. Os nossos dados revelaram que a deleção do gene codY tornou a bactéria mais suscetível à rifampicina, mas não foram encontradas diferenças significativas na sobrevivência bacteriana no sangue ou no plasma humano. Contudo, em estudos funcionais com macrófagos humanos, a estirpe mutante mostrou estimular uma resposta pró-inflamatória mais exacerbada em relação à estirpe selvagem. No geral, os nossos dados sugerem um papel importante do gene codY na virulência de S. epidermidis. |
|---|---|
| Autores principais: | Lopes, Nathalie de Sá |
| Assunto: | Biofilmes codY Células VNC Macrófagos Staphylococcus epidermidis Biofilms Macrophages VBNC cells Engenharia e Tecnologia::Engenharia Médica |
| Ano: | 2023 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | tese de doutoramento |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade do Minho |
| Idioma: | inglês |
| Origem: | RepositóriUM - Universidade do Minho |
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