Expressão das citocinas pro-inflamatorias TNF-a,, IL-1ß, IL-6, IL-8, da proteina pro-apoptotica pBad e ativação do fator de transcrição NF-KB em reservatorios ileais de doentes operados por retocolite ulcerativa inespecifica e por polipose adenomatosa

• Author(s): Leal, Raquel Franco, 1977-
• Date: 2007
• Persistent ID: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1606133
• Origin: Oasisbr
• Subject(s): Cirurgia; Biologia molecular; Intestino - Doenças; Surgery; Molecular biology; Intestinal diseases
• Document Type: Master thesis
• Language: Portuguese

Description

Orientador: Claudio Saddy Rodrigues Coy

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas

Resumo: A ileíte do reservatório pós retocolectomia total constitui uma das complicações mais comuns aos doentes com retocolite ulcerativa (RCUI), apresentando pequena freqüência nos doentes com polipose adenomatosa familiar (PAF). Objetivo: Avaliar a atividade inflamatória em mucosa de reservatórios ileais endoscopicamente normais pela expressão de IL-1ß, IL-6, IL-8, TNF-a, da proteína pró-apoptótica p-Bad e a ativação do NF-?B em doentes operados por RCUI e PAF. Casuística e Métodos: Estudou-se 20 doentes submetidos à retocolectomia total com reservatório ileal (RI) em ¿J¿, sendo 10 doentes com RCUI e 10 com PAF. O grupo controle foi constituído por doentes com íleo-colonoscopia normal. As biópsias foram congeladas em nitrogênio líquido e as expressões de TNF-a, IL-1ß, IL-6, IL-8 e p-Bad foram avaliadas por meio de imunoblot de extrato protéico total. A ativação do NF-?B foi determinada por meio de ensaio de imunoprecipitação e imunoblot. Resultados: Expressões de TNF-a, IL-1ß, IL-6, IL-8 e p-Bad foram maiores em RCUI, quando comparados com PAF (p<0.05), enquanto que a ativação de NF-?B foi similar nestes grupos. Os controles apresentaram pequena expressão de TNF-a (p<0.01), comparados com RCUI e PAF. Conclusão: Os doentes com RCUI apresentaram maiores níveis de expressão das citocinas estudadas, mesmo na ausência de sinais clínicos e endoscópicos de ileíte do reservatório. Além disso, neste grupo, houve expressão aumentada de p-Bad. Estes achados podem justificar a maior susceptibilidade dos doentes operados por RCUI a esta complicação e explicar o aumento da apoptose celular, que estaria correlacionada com a atrofia da mucosa em pacientes com ileíte do reservatório

Abstract: Pouchitis after total retocolectomy is the commonest complication in ulcerative colitis UC), while is quite rare in familial adenomatous polyposis (FAP). Objective: To evaluate the nflammatory activity in endoscopically normal ileal pouch mucosa, by determining the expressions of IL-1ß, IL-6, IL-8, TNF-a, a pro-apoptotic protein, p-Bad and the activation of NF-?B in operated patients with UC and FAP. Patients and Methods: Twenty patients submitted to total retocolectomy and J pouch were evaluated, 10 patients with UC and 10 with FAP. The control group consisted of individuals with normal ileo-colonoscopy examination. The collected specimens were snap-frozen in liquid nitrogen and expression of TNF-a, IL-1ß, IL-6, IL-8 and p-Bad were determined by immunoblot of total protein extracts. NF-?B was evaluated by immunoprecipitation and immunoblot. Results: TNF-a, IL-1ß, IL-6, IL-8 and p-Bad expression was increased in patients with UC, when compared with FAP (p<0.05). Otherwise, NF-?B activation was similar in both groups. The control group had little TNF-a expression (p<0.01) when compared with UC and FAP. Conclusion: Patients with UC had increased cytokines levels, even without clinic and endoscopic evidence of pouchitis. Moreover, there was increased p-Bad expression. These findings may suggest a higher susceptibility to this complication in operated patients with UC, and could explain the increased epithelial cell apoptosis, that could be correlated with the mucosa atrophy in patients with pouchitis

Mestrado

Cirurgia

Mestre em Cirurgia