Genetic profile of two isolates of Trypanosoma evansi from southern Brazil with different parasitaemias

• Autor(es): Duarte, Daniel Pereira ; Komati, Larissa Kaori Oide ; Simiano Tavares, Kaio César ; Lazzarotto, Cícera Regina ; Ferreira, Éden Ramalho de Araújo ; Bahia, Diana ; Miletti, Luiz Claudio
• Data: 2014
• Origem: Oasisbr
• Tipo de Documento: Artigo científico
• Idioma: Inglês

Descrição

Trypanosoma evansi is the most widespread pathogenic trypanosome, due to its ability to be mechanically transmitted by hematophagous flies. Some studies have shown that T. evansi has a high genetic homology among populations around the world, but they have not described the relationships among infection patterns in the host. In this study, we used molecular techniques to determine the genetic variability of two isolates of T. evansi from southern Brazil showing different infection patterns in a murine model. Genetic variability markers were amplified using the techniques described, as well as the presence of DNA from kinetoplast was also checked. We found a very close genetic profile between the isolates of T. evansi using random amplified polymorphic DNA (RAPD) and markers inter-simple sequence repeats (ISSR). Primers derived from the sequence of Trypanosoma brucei maxicircle encoding the subunit 5 of NADH dehydrogenase (nad5) were used to demonstrate the absence of maxicircles, while immunofluorescence was used to check the lack of DNA from kinetoplast. All methods reveal the absence of kDNA, as occurring in American isolates of T. evansi. Perhaps, differences noticed in the phenotypic patterns of animals that were observed during infection are not associated with the molecular changes, but with the adaptation to different hosts, as described for other trypanosomatids.

Trypanosoma evansi é o mais difundido dos tripanossomas patogênicos, devido à sua capacidade de ser transmitido mecanicamente por moscas hematófagas. Alguns estudos têm demonstrado que T. evansi possui uma homologia genética entre populações de todo o mundo, mas não descreveram as relações entre os padrões de infecção no hospedeiro. Neste estudo, foram utilizadas técnicas moleculares para determinar as variabilidades genéticas de dois isolados de T. evansi do Sul do Brasil que mostraram diferentes padrões de infecção em modelo murino. Os marcadores de variabilidade genética foram amplificados utilizando as técnicas descritas, bem como a presença de DNA do cinetoplasto também foi verificado. Foi encontrado um perfil genético muito próximo entre os isolados de T. evansi utilizando random amplified polymorphic DNA (RAPD) e marcadores inter-simple sequence repeats (ISSR). Os iniciadores derivados da sequência de maxicírculos de Trypanosoma brucei que codificam a subunidade 5 da NADH desidrogenase (nad5) foram usados para demonstrar a ausência de maxicírculos, enquanto imunofluorescência foi usada para verificar a ausência de DNA do cinetoplasto. Todos os métodos demonstram a ausência de kDNA, como ocorre nos isolados americanos de T. evansi. As diferenças notadas nos padrões fenótipicos dos animais que foram observadas durante a infecção não estão, provavelmente, relacionados com as alterações moleculares, mas à adaptação a diferentes hospedeiros, como descrito para outros tripanosomatídeos.