Autor(es):
Teixeira, Diego Oliveira ; Oliveira, Elana da Silva ; Fernandes, Juliana de Souza ; Palomino, Gaby Judith Quispe ; Tabosa, Beatriz Evaristo de Alemida ; Barbosa, Hélida Tainan Silva ; Pinheiro, Breno Queiroz ; Silva, Lúcia Daniel Machado da
Data: 2021
Origem: Oasisbr
Assunto(s): Canis familiaris; Almacenamiento en frío; Dimetilsulfóxido; Glicerol; Etilenglicol; Gónada masculina.; Canis familiaris; Cold storage; Dimethylsulfoxide; Glycerol; Ethylene glycol; Male gonad.; Canis familiaris; Conservação pelo frio; Dimetilsulfóxido; Glicerol; Etilenoglicol; Gônada masculina.
Descrição
The aim of this study was to histologically evaluate the testes of prepubertal dogs vitrified with different cryoprotectant associations. For this purpose, 10 testicles from prepubertal dogs were used, which were fragmented into samples of 1 to 2 mm3 and vitrified in different cryoprotectant associations: dimethylsulfoxide (DMSO)/ethylene glycol (EG), EG/glycerol(GLY) and DMSO/GLY. After a period of storage, the samples were warmed and subjected to classical histology and evaluated for cell separation of the basement membrane (SBM), basement membrane retraction (BMR), distinction between Sertoli cells and spermatogonia (DSS), nuclear visualization (NV) and nuclear condensation (NC). In all vitrified groups there was some degree of disorganization of the histological architecture compared to the control. The seminiferous tubules showed poorly developed germinal epithelium, rich in germ cells, good differentiation between spermatogonia and sertoli cells. The 3 vitrified groups had higher SBM compared to the control (P < 0.05) and did not differ from each other. All groups were similar to the control regarding BMR and NV. As for DSS, the DMSO/EG association did not differ from the control or from the EG/GLY association, however, this association and the DMSO/GLY association were significantly lower than the control, the latter being the worst result (P < 0.05). Regarding NC, EG/GLY did not differ from the control, nor from the DMSO/EG which, in turn, was inferior to the control (P < 0.05) and similar to the DMSO/GLY. It was concluded that the DMSO/EG and EG/GLY association were the ones that best preserved testicular integrity after the testicular vitrification process in prepubertal dogs.
El objetivo de este estudio fue evaluar histológicamente los testículos de perros prepúberes vitrificados con diferentes asociaciones de crioprotectores. Para ello se utilizaron 10 testículos de perros prepúberes, los cuales fueron fragmentados en muestras de 1 a 2 mm3 y vitrificados en diferentes asociaciones crioprotectoras: dimetilsulfóxido (DMSO)/etilenglicol (EG), EG/glicerol (GLI) y DMSO/GLI. Después de un período de almacenamiento, las muestras se calentaron y se sometieron a histología clásica y se evaluaron para la separación celular de la membrana basal (SMB), la retracción de la membrana basal (RMB), la distinción entre células de Sertoli y espermatogonias (DSE), visualización nuclear (VN) y condensación nuclear (CN). En todos los grupos vitrificados hubo algún grado de desorganización de la arquitectura histológica en comparación con el control. Los túbulos seminíferos mostraron epitelio germinal poco desarrollado, rico en células germinales, buena diferenciación entre espermatogonias y células de sertoli. Los 3 grupos vitrificados tuvieron mayor SMB en comparación con el control (P <0.05) y no se diferenciaron entre sí. Todos los grupos fueron similares al control con respecto a RMB y VN. En cuanto a DSE, la asociación DMSO/EG no difirió del control ni de la asociación GLI/EG, sin embargo, esta asociación y la asociación DMSO/GLI fueron significativamente menores que el control, siendo este último el peor resultado (P < 0.05). En cuanto a CN, EG/GLI no difirió del control, ni del DMSO/EG que, a su vez, fue inferior al control (P <0.05) y similar al DMSO/GLI. Se concluye que las asociaciones DMSO/EG y EG/GLI fuern las que mejor preservaron la integridad testicular tras el proceso de vitrificación testicular en perros prepúberes.
Objetivou-se avaliar histologicamente os testículos de cães pré-púberes vitrificados com diferentes associações de crioprotetores. Para tanto foram utilizados 10 testículos de cães pré-púberes que foram fragmentados em amostras de 1 a 2 mm3 e vitrificados em diferentes associações de crioprotetores: dimetilsulfóxido (DMSO)/etilenoglicol (EG), EG/glicerol(GLI) e DMSO/GLI. Após um período de armazenamento, as amostras foram aquecidas e submetidas à histologia clássica e avaliadas quanto à separação celular da membrana basal (SMB), retração da membrana basal (RMB), distinção entre células de Sertoli e espermatogônias (DSE), visualização nuclear (VN) e condensação nuclear (CN). Em todos os grupos vitrificados houve algum grau de desorganização da arquitetura histológica comparado ao controle. Os túbulos seminíferos apresentaram epitélio germinativo pouco desenvolvido, rico em células germinativas, boa diferenciação entre espermatogônias e celulas de sertoli. Os 3 grupos vitrificados apresentaram maior SMB em relação ao controle (P < 0,05) e não diferiram entre si. Todos os grupos foram semelhantes ao controle quanto à RMB e VN. Quanto à DSE, a associação DMSO/EG não diferiu do controle, nem da associação EG/GLI, no entanto, essa associação e a associação DMSO/GLI foram significativamente inferiores ao controle, sendo essa última o pior resultado (P < 0.05). Com relação à CN, EGLI não diferiu do controle, nem tampouco do DMSO/EG que, por sua vez foi inferior ao controle (P < 0,05) e similar ao DMSO/GLI. Concluiu-se que as associações DMSO/EG e EG/GLI foram as que melhor preservaram a integridade testicular após o processo de vitrificação testicular de cães pré-púberes.