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Desenvolvimento e implementação de um método de pesquisa de ERAs em amostras de Dried Blood Spots (DBS)

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Resumo:As especificações para a análise de eritropoietina (EPO) e Agonistas do Recetor da Eritropoietina (ERAs) nos laboratórios de antidopagem encontram-se descritas atualmente apenas para urina e soro/plasma. A utilização de dried blood spots (DBS) para análise de substâncias dopantes tem sido uma realidade cada vez mais comum estando esta metodologia a conquistar um lugar de relevo na luta contra a dopagem. Neste sentido, o presente estudo teve como objetivo compreender se o sangue capilar em DBS é um complemento viável para a deteção de EPO e ERAs no âmbito do controlo de dopagem. O estudo envolveu 30 voluntários, aos quais foram colhidos dois spots de 60 μL de sangue capilar no dedo, amostras de sangue venoso (tubo EDTA) e ainda, a quatro voluntários, amostras de urina e sangue (tubos EDTA e seco). Todas as amostras, de DBS, foram imunopurificadas (Kit de Purificação em Gel - MAIIA) e implementados os métodos eletroforéticos sodium N-lauroysarcosinate polyacrilamide gel eletrophoresis (SAR-PAGE) e Western Blot. De modo a identificar qual a quantidade mínima do analito que pode ser detetada pelo método recorrendo a amostras DBS determinaram-se valores de limites de deteção (LODs) para as principais ERAs: BRP, NESP, EPO-Fc e CERA que se concluíram mais elevados do que os definidos para soro e urina. O estudo de estabilidade realizado com amostras de DBS, soro e urina conservadas a diferentes temperaturas (ambiente, 4ºC e -20 ºC), apresentaram resultados promissores para os DBS, ao serem a única matriz que permite a conservação de todas as ERAs ao fim de três meses a qualquer temperatura analisada. Estes resultados apoiam a utilidade dos DBS como matriz biológica complementar para a deteção de EPO e ERAs no controlo de dopagem.
Autores principais:Santos, Sara da Costa Antunes dos
Assunto:Dried Blood Spots Agonistas do recetor da eritropoietina Eritropoietina
Ano:2022
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso aberto
Instituição associada:Instituto Politécnico de Lisboa
Idioma:português
Origem:Repositório Científico do Instituto Politécnico de Lisboa

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