Publicação

Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central

Ver documento

Detalhes bibliográficos
Resumo:Brachyury é um fator de transcrição responsável pelos movimentos morfogénicos durante o processo embriológico da gastrulação para formar as camadas germinativas mesoderme e endoderme. Participa ainda na manutenção de características estaminais das células no botão caudal, garantindo a elongação do eixo anteroposterior do embrião. No adulto, a expressão de Brachyury é diminuta na maioria dos tecidos provenientes da mesoderme, endoderme e ectoderme não-neural. No tecido cerebral adulto, no entanto, é possível detetar expressão de Brachyury. Experiências prévias no laboratório mostraram que Brachyury participa da diferenciação neural, e a diminuição da sua expressão está associada a Gliomas, o tumor mais agressivo do cérebro. Neste trabalho procurou-se compreender quando e onde é expresso Brachyury ao longo do desenvolvimento do sistema nervoso central e qual é a sua função. Através da técnica de hibridação in situ aplicada a embriões de galinha em diversos estadios de desenvolvimento, observou-se que Brachyury é primeiramente expresso nas células da crista neural cranial no estadio HH13 e que, mais tarde, é expresso nas regiões dorsais do telencéfalo e diencéfalo, assim como na região do istmo. Brachyury co-localiza com os genes Pax6 e Wnt8b nestas estruturas. Com recurso à técnica de eletroporação in ovo, foi feita a sobre-expressão de Brachyury e observou-se que não alterou a expressão do gene Wnt8b no cérebro em desenvolvimento. Neste trabalho, foi também iniciada a otimização da técnica de imunohistoquímica in toto, para localização da proteína Brachyury, bem como da técnica de RT-qPCR de forma a genotipar embriões de murganho provenientes do cruzamento de mutantes T+/-, para estudos futuros. É necessário continuar o processo de otimização, focando no desenho de novos primers, os Intron-spanning primers.
Autores principais:Militão, Inês Torradinhas
Assunto:Brachyury Sistema nervoso central Gallus gallus Embrião
Ano:2024
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso embargado
Instituição associada:Universidade do Algarve
Idioma:português
Origem:Sapientia - Universidade do Algarve
_version_ 1867050667860819968
author Militão, Inês Torradinhas
author_facet Militão, Inês Torradinhas
author_role author
contributor_name_str_mv Andrade, Raquel
Araújo, Inês
Sapientia
country_str PT
creators_json_txt [{\"Person.name\":\"Militão, Inês Torradinhas\"}]
datacite.contributors.contributor.contributorName.fl_str_mv Andrade, Raquel
Araújo, Inês
Sapientia
datacite.creators.creator.creatorName.fl_str_mv Militão, Inês Torradinhas
datacite.date.Accepted.fl_str_mv 2024-11-12T00:00:00Z
datacite.date.available.fl_str_mv 2025-07-28T10:51:09Z
datacite.date.embargoed.fl_str_mv 2025-07-28T10:51:09Z
datacite.rights.fl_str_mv http://purl.org/coar/access_right/c_f1cf
datacite.subjects.subject.fl_str_mv Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
datacite.titles.title.fl_str_mv Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
dc.contributor.none.fl_str_mv Andrade, Raquel
Araújo, Inês
Sapientia
dc.creator.none.fl_str_mv Militão, Inês Torradinhas
dc.date.Accepted.fl_str_mv 2024-11-12T00:00:00Z
dc.date.available.fl_str_mv 2025-07-28T10:51:09Z
dc.date.embargoed.fl_str_mv 2025-07-28T10:51:09Z
dc.description.none.fl_str_mv Brachyury is a transcription factor responsible for morphogenetic movements during the embryological process of gastrulation, forming the mesoderm and endoderm germ layers. It also participates in maintaining stem cell characteristics in the tail bud, ensuring the elongation of the anteroposterior axis of the embryo. In adults, the expression of Brachyury is low in most tissues derived from the mesoderm, endoderm, and non-neural ectoderm. However, in adult brain tissue, Brachyury expression can be detected. Previous experiments in the laboratory have shown that Brachyury is involved in neural differentiation, and the decrease in its expression is associated with gliomas, the most aggressive brain tumor. This study aimed to understand when and where Brachyury is expressed throughout the development of the central nervous system and what is it’s function. Using the in situ hybridization technique applied to chicken embryos at various developmental stages, it was observed that Brachyury is first expressed in the cranial neural crest cells at stage HH13, and later is expressed in the dorsal regions of the telencephalon and diencephalon, as well as in the isthmus region. Brachyury co-localizes with the genes Pax6 and Wnt8b in these structures. Using the in ovo electroporation technique, Brachyury overexpression was performed, and it was observed that it did not alter the expression of the Wnt8b gene in the developing brain. This study also initiated the optimization of the in toto immunohistochemistry technique for locating Brachyury protein, as well as the RT-qPCR technique to genotype embryos from T+/- mutant crosses for future studies. It is necessary to continue the optimization process, focusing on designing new primers, the intron-spanning primers.
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.identifier.none.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10400.1/27502
dc.language.none.fl_str_mv por
dc.rights.cclincense.fl_str_mv http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.rights.none.fl_str_mv http://purl.org/coar/access_right/c_f1cf
dc.subject.none.fl_str_mv Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
dc.title.fl_str_mv Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
dc.type.none.fl_str_mv http://purl.org/coar/resource_type/c_bdcc
description Brachyury é um fator de transcrição responsável pelos movimentos morfogénicos durante o processo embriológico da gastrulação para formar as camadas germinativas mesoderme e endoderme. Participa ainda na manutenção de características estaminais das células no botão caudal, garantindo a elongação do eixo anteroposterior do embrião. No adulto, a expressão de Brachyury é diminuta na maioria dos tecidos provenientes da mesoderme, endoderme e ectoderme não-neural. No tecido cerebral adulto, no entanto, é possível detetar expressão de Brachyury. Experiências prévias no laboratório mostraram que Brachyury participa da diferenciação neural, e a diminuição da sua expressão está associada a Gliomas, o tumor mais agressivo do cérebro. Neste trabalho procurou-se compreender quando e onde é expresso Brachyury ao longo do desenvolvimento do sistema nervoso central e qual é a sua função. Através da técnica de hibridação in situ aplicada a embriões de galinha em diversos estadios de desenvolvimento, observou-se que Brachyury é primeiramente expresso nas células da crista neural cranial no estadio HH13 e que, mais tarde, é expresso nas regiões dorsais do telencéfalo e diencéfalo, assim como na região do istmo. Brachyury co-localiza com os genes Pax6 e Wnt8b nestas estruturas. Com recurso à técnica de eletroporação in ovo, foi feita a sobre-expressão de Brachyury e observou-se que não alterou a expressão do gene Wnt8b no cérebro em desenvolvimento. Neste trabalho, foi também iniciada a otimização da técnica de imunohistoquímica in toto, para localização da proteína Brachyury, bem como da técnica de RT-qPCR de forma a genotipar embriões de murganho provenientes do cruzamento de mutantes T+/-, para estudos futuros. É necessário continuar o processo de otimização, focando no desenho de novos primers, os Intron-spanning primers.
dirty 0
eu_rights_str_mv embargoedAccess
format masterThesis
fulltext.url.fl_str_mv https://sapientia.ualg.pt/bitstreams/488b3222-edcb-4763-9361-9e3905580da4/download
id sapientia_52953a02a8eeeaee467897c580d58a2f
identifier.url.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10400.1/27502
instacron_str ualg
institution Universidade do Algarve
instname_str Universidade do Algarve
language por
network_acronym_str sapientia
network_name_str Sapientia - Universidade do Algarve
oai_identifier_str oai:sapientia.ualg.pt:10400.1/27502
organization_str_mv urn:organizationAcronym:ualg
person_str_mv Militão, Inês Torradinhas
publishDate 2024
reponame_str Sapientia - Universidade do Algarve
repository_id_str urn:repositoryAcronym:sapientia
service_str_mv urn:repositoryAcronym:sapientia
spelling porporBrachyury é um fator de transcrição responsável pelos movimentos morfogénicos durante o processo embriológico da gastrulação para formar as camadas germinativas mesoderme e endoderme. Participa ainda na manutenção de características estaminais das células no botão caudal, garantindo a elongação do eixo anteroposterior do embrião. No adulto, a expressão de Brachyury é diminuta na maioria dos tecidos provenientes da mesoderme, endoderme e ectoderme não-neural. No tecido cerebral adulto, no entanto, é possível detetar expressão de Brachyury. Experiências prévias no laboratório mostraram que Brachyury participa da diferenciação neural, e a diminuição da sua expressão está associada a Gliomas, o tumor mais agressivo do cérebro. Neste trabalho procurou-se compreender quando e onde é expresso Brachyury ao longo do desenvolvimento do sistema nervoso central e qual é a sua função. Através da técnica de hibridação in situ aplicada a embriões de galinha em diversos estadios de desenvolvimento, observou-se que Brachyury é primeiramente expresso nas células da crista neural cranial no estadio HH13 e que, mais tarde, é expresso nas regiões dorsais do telencéfalo e diencéfalo, assim como na região do istmo. Brachyury co-localiza com os genes Pax6 e Wnt8b nestas estruturas. Com recurso à técnica de eletroporação in ovo, foi feita a sobre-expressão de Brachyury e observou-se que não alterou a expressão do gene Wnt8b no cérebro em desenvolvimento. Neste trabalho, foi também iniciada a otimização da técnica de imunohistoquímica in toto, para localização da proteína Brachyury, bem como da técnica de RT-qPCR de forma a genotipar embriões de murganho provenientes do cruzamento de mutantes T+/-, para estudos futuros. É necessário continuar o processo de otimização, focando no desenho de novos primers, os Intron-spanning primers.engBrachyury is a transcription factor responsible for morphogenetic movements during the embryological process of gastrulation, forming the mesoderm and endoderm germ layers. It also participates in maintaining stem cell characteristics in the tail bud, ensuring the elongation of the anteroposterior axis of the embryo. In adults, the expression of Brachyury is low in most tissues derived from the mesoderm, endoderm, and non-neural ectoderm. However, in adult brain tissue, Brachyury expression can be detected. Previous experiments in the laboratory have shown that Brachyury is involved in neural differentiation, and the decrease in its expression is associated with gliomas, the most aggressive brain tumor. This study aimed to understand when and where Brachyury is expressed throughout the development of the central nervous system and what is it’s function. Using the in situ hybridization technique applied to chicken embryos at various developmental stages, it was observed that Brachyury is first expressed in the cranial neural crest cells at stage HH13, and later is expressed in the dorsal regions of the telencephalon and diencephalon, as well as in the isthmus region. Brachyury co-localizes with the genes Pax6 and Wnt8b in these structures. Using the in ovo electroporation technique, Brachyury overexpression was performed, and it was observed that it did not alter the expression of the Wnt8b gene in the developing brain. This study also initiated the optimization of the in toto immunohistochemistry technique for locating Brachyury protein, as well as the RT-qPCR technique to genotype embryos from T+/- mutant crosses for future studies. It is necessary to continue the optimization process, focusing on designing new primers, the intron-spanning primers.application/pdfElucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso centralMilitão, Inês TorradinhasAndrade, RaquelAraújo, InêsHostingInstitutionOrganizationalSapientiae-mailmailto:repositorio@ualg.ptrepositorio@ualg.ptURNurn:tid:2039119382025-07-28T10:51:09Z2024-11-122024-11-12T00:00:00ZHandlehttp://hdl.handle.net/10400.1/27502http://purl.org/coar/access_right/c_f1cfembargoed accessBrachyurySistema nervoso centralGallus gallusEmbrião2058070 bytesliteraturehttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccmaster thesis2024-11-12http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/http://purl.org/coar/access_right/c_f1cfapplication/pdffulltexthttps://sapientia.ualg.pt/bitstreams/488b3222-edcb-4763-9361-9e3905580da4/download
spellingShingle Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
Militão, Inês Torradinhas
Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
status SINGLETON
subject.fl_str_mv Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
title Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
title_full Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
title_fullStr Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
title_full_unstemmed Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
title_short Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
title_sort Elucidação do papel de Brachyury no desenvolvimento do sistema nervoso central
topic Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
topic_facet Brachyury
Sistema nervoso central
Gallus gallus
Embrião
url http://hdl.handle.net/10400.1/27502
visible 1