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Identification and pharmacological evaluation of surrogate ligands of cannabinoid receptors

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Resumo:Os recetores acoplados à proteína G (GPCRs) constituem a maior família de recetores membranares, sendo essenciais no controlo de processos fisiológicos e patofisiológicos, como cancro, hipertensão, entre outros. O número de fármacos direcionados para estes recetores tem vindo a aumentar, contando com mais de 475 aprovados pela FDA. Neste estudo focámo-nos em quatro recetores: Recetor Canabinoide 1 (CB1) e 2 (CB2) e recetor acoplado à proteína G 18 (GPR18) e 55 (GPR55), dois recetores órfãos. CB1 e CB2 pertencem à classe A da família de GPCRs. A expressão de CB1 é elevada no sistema nervoso central, enquanto que CB2 é abundante em órgãos periféricos com função imunitária. GPR55 pertence à classe A da família de GPCRs, sendo sugerido como alvo terapêutico na diabetes, obesidade, osteoporose e cancro. GPR18 pertence também à classe A e poderá ser alvo em terapias para cancro e doenças inflamatórias. O objetivo deste estudo consistiu na identificação e avaliação farmacológica de ligandos destes recetores. Estudos anteriores do nosso laboratório identificaram alguns compostos, de uma biblioteca de compostos in-house, capazes de modular a atividade destes recetores. Tendo por base a estrutura molecular destes, fizemos o screening do efeito antagonista e agonista destes novos compostos, pertencentes também à nossa biblioteca. Seguidamente ao screening inicial, foram realizados estudos de seletividade e potência, recorrendo a ensaios de recrutamento de β-arrestina, ligação de radioligandos e acumulação de cAMP. Para o GPR18 foram testadas duas séries de compostos (biblioteca de compostos 1 e 2), enquanto que para o CB2 foi testada apenas uma série de compostos (biblioteca de compostos 3). Os estudos de seletividade foram realizados com GPR55 e CB1, respetivamente. Os nossos resultados identificaram um composto promissor para GPR18 (EC50(composto56)=0.0302±0.004 μM) e um para CB2 (Ki(composto76)=0.339±0.061 µM). No entanto, mais testes devem ser executados, de forma a clarificar se estes compostos conseguem efetivamente modular a atividade destes recetores. Futuramente, será necessária a realização de novos estudos, permitindo compreender como estes compostos modulam a atividade destes recetores e otimizar a mesma, com objetivo de desenvolver novas moléculas a serem usadas como terapêuticas em várias disfunções relacionadas com CB1, CB2, GPR18 e GPR55.
Autores principais:Castanheira, Mariana Sofia Gregório
Assunto:G-protein coupled receptors Cannabinoid receptors GPR55 GPR18 Surrogate ligands. Mestrado Integrado - 2019
Ano:2019
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso aberto
Instituição associada:Universidade de Lisboa
Idioma:inglês
Origem:Repositório da Universidade de Lisboa
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