Publicação

Modelos celulares e genéticos em tumores mamários de gata

Detalhes bibliográficos
Resumo:	Os tumores espontâneos nos animais de companhia, e especificamente, no gato (Felis catus), têm sido apontados como os modelos possivelmente mais adequados para o estudo da carcinogénese. Porém, as amostras de tecido tumoral que representam o cancro in vivo, representam apenas um momento estanque da sua evolução e do seu processo de desenvolvimento. Surgem então as linhas celulares que reproduzem in vitro as características que os tumores apresentam in vivo. As linhas celulares exibem propriedades únicas como, a facilidade de propagação e de manipulação genética e a reprodutibilidade de resultados que as tornam num dos melhores modelos celulares actuais para o estudo da carcinogénese. Um dos objectivos principais deste trabalho foi a estipulação de uma linha celular de tumor mamário de gata. Para a sua estipulação recorreu-se a diversa metodologia inerente ao processamento de cultura de células. Uma vez que a importância causal de algumas alterações cromossómicas na carcinogénese está perfeitamente estabelecida no Homem, e comparativamente, os estudos citogenéticos e moleculares descritos em tumores mamários de animais de companhia, especialmente de gata são escassos, a caracterização destas alterações nos tumores mamários de gata é de extrema importância para a compreensão da base cromossómica deste tipo de tumor nesta espécie, fornecendo também um importante conhecimento dos tumores mamários humanos. Com o objectivo de caracterizar as alterações cromossómicas presentes na 15ª passagem da linha em estipulação (a primeira passagem onde foram detectadas alterações cromossómicas), foram utilizadas as técnicas de bandeamento-G e “Chromosome Painting”. É importante referir que a metodologia de “Chromosome Painting” nunca antes tinha sido aplicada para a caracterização de linhas celulares tumorais de Felis catus. A combinação de técnicas de citogenética clássica e molecular permitiu a identificação dos vários cromossomas de Felis catus, bem como a detecção e identificação de rearranjos cromossómicos, bem como dos cromossomas envolvidos nesses rearranjos. Esta informação permitiu a identificação de vários clones existentes na 15ª passagem da linha celular, com base no facto de que nas células tumorais, as anomalias cromossómicas adquiridas são consistentes e partilhadas por várias células sugerindo uma origem clonal. Foi também pela primeira vez utilizado o “Comparative Genomic Hibridization” - CGH na caracterização de cinco carcinomas mamários de gata. Esta metodologia permitiu medir quantitativamente as alterações não equilibradas que ocorreram nas células destes tumores. Apresentou-se como uma valiosa metodologia para identificação de regiões no genoma padrão, que, quando alteradas a nível do número de sequências podem contribuir para a iniciação e/ou progressão de um tumor, nomeadamente, as regiões que apresentam um elevado número de cópias de uma sequência de DNA podem alojar oncogenes, e regiões que exibam um decréscimo no número de cópias de uma sequência de DNA podem conter genes supressores de tumores. A aplicação desta técnica em combinação com análises in silico em diversas bases de dados, permitiu localizar regiões que apresentavam alterações no número de cópias de sequências de DNA nos genomas tumorais em estudo, e através da extrapolação das regiões sinténicas entre a espécie Homo sapiens e a espécie em estudo, foi possível estabelecer uma correlação entre as anomalias verificadas e as sequências possivelmente envolvidas nessas regiões, nomeadamente a existência de genes críticos de cancro. A caracterização de anomalias cromossómicas presentes nos genomas de tumores mamários de gata será de extrema relevância não só para o conhecimento dos tumores mamários de gata, mas fundamentalmente porque proporcionará conhecimento fundamental sobre a etiologia e o comportamento molecular das células cancerosas em tumores mamários humanos, ao nível de programas de oncologia comparada.
Autores principais:	Borges, Ana Luísa Pereira
Assunto:	Citogenética Neoplasias mamárias Carcinogénese Modelos genéticos Modelos celulares
Ano:	2009
País:	Portugal
Tipo de documento:	dissertação de mestrado
Tipo de acesso:	acesso restrito
Instituição associada:	Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro
Idioma:	português
Origem:	Repositório da UTAD