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Embriogénese somática e outros ensaios in vitro em duas espécies de loureiro (Laurus nobilis e Laurus azorica)

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Detalhes bibliográficos
Resumo:O loureiro (Laurus nobilis L.) é uma árvore ou arbusto da família Lauraceae. Encontra-se distribuído por toda a bacia do Mediterrânico onde as suas folhas são muito utilizadas na culinária. O loureiro-bravo (Laurus azorica (Seub.) Franco) é um arbusto ou árvore da mesma família cuja distribuição está limitada ao arquipélago dos Açores, sendo importante medidas de conservação da espécie, que já foi catalogada no livro vermelho das espécies ameaçadas. Ambas as espécies são dióicas e têm baixas taxas de germinação natural. A propagação por métodos convencionais também não ocorre com facilidade. Assim, estudos de embriogénese somática têm vindo a ser realizados, para implementar um protocolo de multiplicação in vitro destas espécies bem como para compreender melhor a embriogénese somática em lenhosas. A embriogénese somática é uma técnica de Biotecnologia Vegetal com grande potencial para propagação de plantas em larga escala. Neste trabalho tentou-se o estabelecimento das duas espécies quer a partir do material adulto, quer a partir de explantes jovens, tendo em vista o estabelecimento de um protocolo eficiente de micropropagação. Duas auxinas, 2,4-D e Picloram, em diferentes concentrações, foram testadas na indução de embriogénese somática. A análise histológica efectuada em diferentes fases da resposta embriogénica mostrou que a fraca germinação obtida em estudos anteriores, poderá dever-se às poucas reservas acumuladas pelos embriões somáticos, bem como à ausência de SAM em algumas secções de embriões somáticos. A resposta mais comum foi a formação de calos embriogénicos, tendo sido testados vários meios para promover o seu desenvolvimento em embriões somáticos. A verificação da capacidade embriogénica em tecidos embriogénicos obtidos há treze anos em L. nobilis foi outro dos estudos efectuados, tendo-se verificado uma perda do potencial deste tecido evoluir em embriões somáticos. Apesar de a obtenção de embriões somáticos não ter sido conseguida, a acção do inibidor fluoridona foi interessante pela desdiferenciação que provocou no tecido embriogénico, tendo análises citológicas comprovado que o tecido proveniente da acção da fluoridona apresentava células com características meristemáticas, ao invés de todos os outros que apresentavam células com algum grau de diferenciação. A embriogénese somática repetitiva é a obtenção de embriões somáticos secundários utilizando embriões somáticos primários como explante. A embriogénese secundária em L. azorica foi conseguida neste trabalho tendo sido utilizado o mesmo protocolo de L. nobilis já descrito na literatura.
Autores principais:Baptista, Renato Ferreira
Assunto:Auxina Estudos histológicos Gemas caulinares In vitro Tecido embriogénico
Ano:2012
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso aberto
Instituição associada:Universidade de Coimbra
Idioma:português
Origem:Estudo Geral - Universidade de Coimbra
Descrição
Resumo:O loureiro (Laurus nobilis L.) é uma árvore ou arbusto da família Lauraceae. Encontra-se distribuído por toda a bacia do Mediterrânico onde as suas folhas são muito utilizadas na culinária. O loureiro-bravo (Laurus azorica (Seub.) Franco) é um arbusto ou árvore da mesma família cuja distribuição está limitada ao arquipélago dos Açores, sendo importante medidas de conservação da espécie, que já foi catalogada no livro vermelho das espécies ameaçadas. Ambas as espécies são dióicas e têm baixas taxas de germinação natural. A propagação por métodos convencionais também não ocorre com facilidade. Assim, estudos de embriogénese somática têm vindo a ser realizados, para implementar um protocolo de multiplicação in vitro destas espécies bem como para compreender melhor a embriogénese somática em lenhosas. A embriogénese somática é uma técnica de Biotecnologia Vegetal com grande potencial para propagação de plantas em larga escala. Neste trabalho tentou-se o estabelecimento das duas espécies quer a partir do material adulto, quer a partir de explantes jovens, tendo em vista o estabelecimento de um protocolo eficiente de micropropagação. Duas auxinas, 2,4-D e Picloram, em diferentes concentrações, foram testadas na indução de embriogénese somática. A análise histológica efectuada em diferentes fases da resposta embriogénica mostrou que a fraca germinação obtida em estudos anteriores, poderá dever-se às poucas reservas acumuladas pelos embriões somáticos, bem como à ausência de SAM em algumas secções de embriões somáticos. A resposta mais comum foi a formação de calos embriogénicos, tendo sido testados vários meios para promover o seu desenvolvimento em embriões somáticos. A verificação da capacidade embriogénica em tecidos embriogénicos obtidos há treze anos em L. nobilis foi outro dos estudos efectuados, tendo-se verificado uma perda do potencial deste tecido evoluir em embriões somáticos. Apesar de a obtenção de embriões somáticos não ter sido conseguida, a acção do inibidor fluoridona foi interessante pela desdiferenciação que provocou no tecido embriogénico, tendo análises citológicas comprovado que o tecido proveniente da acção da fluoridona apresentava células com características meristemáticas, ao invés de todos os outros que apresentavam células com algum grau de diferenciação. A embriogénese somática repetitiva é a obtenção de embriões somáticos secundários utilizando embriões somáticos primários como explante. A embriogénese secundária em L. azorica foi conseguida neste trabalho tendo sido utilizado o mesmo protocolo de L. nobilis já descrito na literatura.