Publicação
Eucalyptus globulus plant regeneration via somatic embryogenesis
| Resumo: | A embriogénese somática (ES) foi investigada em Eucalyptus globulus com vista a desenvolver um protocolo padrão de micropropagação, desde a indução à aclimatização. A propagação clonal de E. globulus recorrendo a ES tem o potencial de ir ao encontro das necessidades industriais de material de alta qualidade e uniforme, e de rapidamente capturar os benefícios dos programas de melhoramento, sendo encarada como um método efectivo de conseguir ganhos genéticos num curto espaço de tempo. O Capítulo I faz uma revisão da importância de E. globulus, assim como de alguns aspectos mais importantes relativos à micropropagação via embriogénese somática, e dedica uma secção ao conhecimento actual sobre o uso da embriogénese somática no género Eucalyptus. Finalmente, os objectivos de investigação desta Tese são apresentados. O Capítulo II centra-se no processo de ES primário, sobretudo nas condições que influenciam a indução do potencial embriogénico. Este Capítulo está dividido em 5 grandes estudos: No Capítulo II.1 o tipo de explante, a fonte de carbohidratos e a exposição a reguladores de crescimento na embriogénese somática é realçada. Neste Capítulo publica-se, pela primeira vez, a regeneração de plantas por embriogénese somática nesta espécie. No Capítulo II.2 é discutida a influência da composição salina dos meios e a adição de antioxidantes. No Capítulo II.3 é efectuada uma comparação preliminar entre a composição salina do meio de cultura e o conteúdo mineral dos explantes (embriões zigóticos). No Capítulo II.4 são apresentados estudos histocitológicos e de acumulação de reservas em E. globulus durante a indução, expressão e diferentes estádios de desenvolvimento do embrião somático primário. Esta informação sobre as alterações observadas contribui para uma melhor compreensão do processo de ES primária. Finalmente, e com base nos resultados obtidos no Capítulo II.1 e II.2, está agora disponível um protocolo padrão (standard) para induzir ES primária e regeneração de plantas a partir de embriões zigóticos que permitiu os estudos de controlo genético apresentados no Capítulo II. 5. Neste estudo a frequência de ES foi estudada em 13 famílias de polinização aberta durante três anos consecutivos e a indução de ES provou ser uma característica variável entre as 13 famílias e entre os anos de produção de semente testados. Baseado nestes resultados, os estudos de controlo genético foram conduzidos recorrendo a um cruzamento dialélico com cinco árvores parentais; os resultados obtidos sugeriram que a indução de ES está sobre controlo de efeitos genéticos aditivos. No capítulo III, os estudos apresentados direccionaram-se para a ES secundária. O estabelecimento da ES secundária só foi possível depois de se obter a ES primária nesta espécie. Tal como é descrito no Capítulo III.1, este processo repetitivo de ES mostrou-se reprodutível levando à obtenção de grande quantidade de material embriogénico. Os resultados obtidos, relativamente ao nível de ploidia e conteúdo de DNA deste material embriogénico, comprovaram que o protocolo utilizado na proliferação de embriões somáticos secundários não afectou estes parâmetros. De forma a optimizar a manutenção/ multiplicação e conversão destes embriões em plantas, alguns factores como a composição do meio basal, reguladores de crescimento e intensidade luminosa foram investigados no Capítulo III.2. No capítulo III.3, é estudado o último e crucial passo do processo ES, a aclimatização. A aclimatização de plantas derivadas de ES é acompanhado por estudos histocitológicos e por análises de variação de ploidia. Finalmente, no Capítulo IV são apresentadas as conclusões da Tese de Doutoramento, onde alguns aspectos inovadores deste processo de ES nesta espécie recalcitrante são realçados. |
|---|---|
| Autores principais: | Pinto, Glória Catarina Cintra da Costa |
| Assunto: | Biologia Embriologia vegetal Crescimento vegetal Regeneração (fisiologia) - Plantas |
| Ano: | 2007 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | tese de doutoramento |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Aveiro |
| Idioma: | inglês |
| Origem: | RIA - Repositório Institucional da Universidade de Aveiro |
| Resumo: | A embriogénese somática (ES) foi investigada em Eucalyptus globulus com vista a desenvolver um protocolo padrão de micropropagação, desde a indução à aclimatização. A propagação clonal de E. globulus recorrendo a ES tem o potencial de ir ao encontro das necessidades industriais de material de alta qualidade e uniforme, e de rapidamente capturar os benefícios dos programas de melhoramento, sendo encarada como um método efectivo de conseguir ganhos genéticos num curto espaço de tempo. O Capítulo I faz uma revisão da importância de E. globulus, assim como de alguns aspectos mais importantes relativos à micropropagação via embriogénese somática, e dedica uma secção ao conhecimento actual sobre o uso da embriogénese somática no género Eucalyptus. Finalmente, os objectivos de investigação desta Tese são apresentados. O Capítulo II centra-se no processo de ES primário, sobretudo nas condições que influenciam a indução do potencial embriogénico. Este Capítulo está dividido em 5 grandes estudos: No Capítulo II.1 o tipo de explante, a fonte de carbohidratos e a exposição a reguladores de crescimento na embriogénese somática é realçada. Neste Capítulo publica-se, pela primeira vez, a regeneração de plantas por embriogénese somática nesta espécie. No Capítulo II.2 é discutida a influência da composição salina dos meios e a adição de antioxidantes. No Capítulo II.3 é efectuada uma comparação preliminar entre a composição salina do meio de cultura e o conteúdo mineral dos explantes (embriões zigóticos). No Capítulo II.4 são apresentados estudos histocitológicos e de acumulação de reservas em E. globulus durante a indução, expressão e diferentes estádios de desenvolvimento do embrião somático primário. Esta informação sobre as alterações observadas contribui para uma melhor compreensão do processo de ES primária. Finalmente, e com base nos resultados obtidos no Capítulo II.1 e II.2, está agora disponível um protocolo padrão (standard) para induzir ES primária e regeneração de plantas a partir de embriões zigóticos que permitiu os estudos de controlo genético apresentados no Capítulo II. 5. Neste estudo a frequência de ES foi estudada em 13 famílias de polinização aberta durante três anos consecutivos e a indução de ES provou ser uma característica variável entre as 13 famílias e entre os anos de produção de semente testados. Baseado nestes resultados, os estudos de controlo genético foram conduzidos recorrendo a um cruzamento dialélico com cinco árvores parentais; os resultados obtidos sugeriram que a indução de ES está sobre controlo de efeitos genéticos aditivos. No capítulo III, os estudos apresentados direccionaram-se para a ES secundária. O estabelecimento da ES secundária só foi possível depois de se obter a ES primária nesta espécie. Tal como é descrito no Capítulo III.1, este processo repetitivo de ES mostrou-se reprodutível levando à obtenção de grande quantidade de material embriogénico. Os resultados obtidos, relativamente ao nível de ploidia e conteúdo de DNA deste material embriogénico, comprovaram que o protocolo utilizado na proliferação de embriões somáticos secundários não afectou estes parâmetros. De forma a optimizar a manutenção/ multiplicação e conversão destes embriões em plantas, alguns factores como a composição do meio basal, reguladores de crescimento e intensidade luminosa foram investigados no Capítulo III.2. No capítulo III.3, é estudado o último e crucial passo do processo ES, a aclimatização. A aclimatização de plantas derivadas de ES é acompanhado por estudos histocitológicos e por análises de variação de ploidia. Finalmente, no Capítulo IV são apresentadas as conclusões da Tese de Doutoramento, onde alguns aspectos inovadores deste processo de ES nesta espécie recalcitrante são realçados. |
|---|