Publicação
Lipid-based nanoparticles for annonacin delivery for glioblastoma application
| Resumo: | O Glioblastoma (GBM), especificamente a variante Isocitrate Dehydrogenase (IDH) wild-type, é um tumor agressivo com um prognóstico desfavorável, uma vez que 90% dos pacientes ainda sofrem recorrência após o tratamento multimodal, devido á sua natureza infiltrativa. Com o propósito de minimizar esta recorrência, o presente estudo desenvolveu e avaliou uma nova estratégia terapêutica para o tratamento do GBM resistente, integrando um sistema de administração de fármacos baseado em nanopartículas lipídicas, com um composto natural conhecido pelas suas propriedades citotóxicas, a anonacina. Os lipossomas com e sem fármaco foram sintetizados, e as suas propriedades físico-químicas foram caracterizadas usando dispersão dinâmica de luz e microscopia eletrónica de transmissão criogénica. A eficiência de encapsulação e a percentagem de incorporação do fármaco nos lipossomas foram obtidas através de cromatografia líquida de alta eficiência. A citotoxicidade da anonacina livre e dos lipossomas sem fármaco foi avaliada em células de GBM U87, utilizando uma cultura de monocamada convencional e um modelo tridimensional (3D) de esferoide, mais relevante do ponto de vista fisiológico. Os seus efeitos citotóxicos foram avaliados através de ensaios de viabilidade celular, incluindo CellTiter e ensaios live/dead. Os resultados obtidos confirmam os efeitos citotóxicos da anonacina livre em cultura de monocamada, demonstrando que a concentração necessária para inibir 50% das células (IC50) foi de 27,98 ng/mL após 24 h e 15 ng/mL após 48 h. O modelo 3D de esferoide otimizado demonstra ser uma plataforma viável para avaliar os efeitos do fármaco, revelando que a anonacina livre atinge a saturação a uma concentração acima de 50 g/mL, um resultado corroborado pelas imagens obtidas por microscopia confocal. Verifica-se que os lipossomas sem fármaco apresentam dimensões e estabilidade adequados para a sua administração, com tamanho médio de 156,9 nm, índice de polidispersidade de 0,148 e potencial zeta de −4,99 mV. No entanto, o método de hidratação do filme lipídico prova ser ineficiente para incorporar a anonacina altamente hidrofóbica, resultando numa eficiência de encapsulamento de apenas 1-2%. Apesar da baixa eficiência de encapsulação, os dados obtidos constituem uma base relevante para futuras investigações focadas na otimização da formulação e dos métodos de produção, a fim de melhorar o desempenho terapêutico dos lipossomas com anonacina. |
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| Autores principais: | Ferreira, Marta Sofia Branco |
| Assunto: | Glioblastoma Anonacina Modelo 3D Esferoides DDS Lipossoma Nanopartículas Annonacin 3D model Spheroid Liposome Nanoparticles |
| Ano: | 2025 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso embargado |
| Instituição associada: | Universidade do Minho |
| Idioma: | inglês |
| Origem: | RepositóriUM - Universidade do Minho |
| Resumo: | O Glioblastoma (GBM), especificamente a variante Isocitrate Dehydrogenase (IDH) wild-type, é um tumor agressivo com um prognóstico desfavorável, uma vez que 90% dos pacientes ainda sofrem recorrência após o tratamento multimodal, devido á sua natureza infiltrativa. Com o propósito de minimizar esta recorrência, o presente estudo desenvolveu e avaliou uma nova estratégia terapêutica para o tratamento do GBM resistente, integrando um sistema de administração de fármacos baseado em nanopartículas lipídicas, com um composto natural conhecido pelas suas propriedades citotóxicas, a anonacina. Os lipossomas com e sem fármaco foram sintetizados, e as suas propriedades físico-químicas foram caracterizadas usando dispersão dinâmica de luz e microscopia eletrónica de transmissão criogénica. A eficiência de encapsulação e a percentagem de incorporação do fármaco nos lipossomas foram obtidas através de cromatografia líquida de alta eficiência. A citotoxicidade da anonacina livre e dos lipossomas sem fármaco foi avaliada em células de GBM U87, utilizando uma cultura de monocamada convencional e um modelo tridimensional (3D) de esferoide, mais relevante do ponto de vista fisiológico. Os seus efeitos citotóxicos foram avaliados através de ensaios de viabilidade celular, incluindo CellTiter e ensaios live/dead. Os resultados obtidos confirmam os efeitos citotóxicos da anonacina livre em cultura de monocamada, demonstrando que a concentração necessária para inibir 50% das células (IC50) foi de 27,98 ng/mL após 24 h e 15 ng/mL após 48 h. O modelo 3D de esferoide otimizado demonstra ser uma plataforma viável para avaliar os efeitos do fármaco, revelando que a anonacina livre atinge a saturação a uma concentração acima de 50 g/mL, um resultado corroborado pelas imagens obtidas por microscopia confocal. Verifica-se que os lipossomas sem fármaco apresentam dimensões e estabilidade adequados para a sua administração, com tamanho médio de 156,9 nm, índice de polidispersidade de 0,148 e potencial zeta de −4,99 mV. No entanto, o método de hidratação do filme lipídico prova ser ineficiente para incorporar a anonacina altamente hidrofóbica, resultando numa eficiência de encapsulamento de apenas 1-2%. Apesar da baixa eficiência de encapsulação, os dados obtidos constituem uma base relevante para futuras investigações focadas na otimização da formulação e dos métodos de produção, a fim de melhorar o desempenho terapêutico dos lipossomas com anonacina. |
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