Publicação

Avaliação do papel da matriz de biofilmes de Candida glabrata na sua resistência ao voriconazol

Detalhes bibliográficos
Resumo:	As infeções causadas por espécies de Candida (candidíases) têm aumentado consideravelmente nas últimas décadas. Apesar da principal espécie causadora ser Candida albicans, recentemente, outras espécies de Candida têm surgido como patogénicos comuns, como Candida glabrata que é atualmente a segunda espécie mais frequente. Esta espécie é de elevada importância clínica uma vez que possui elevada resistência aos antifúngicos mais usados em prática clínica, como o fluconazol. Por tal, têm emergido triazóis de segunda geração como o voriconazol, com maior potência e atividade. A formação de biofilmes é um dos fatores de virulência que mais contribui para a patogenicidade das espécies de Candida, sendo aceite que a sua matriz desempenha um papel essencial na elevada resistência apresentada pelos mesmos. No entanto, há falta de conhecimento sobre a composição da matriz de biofilmes de C. glabrata e sobre o papel dessa composição na resistência antifúngica. O objetivo deste trabalho foi então, o estudo de compostos presentes na matriz de biofilmes de C. glabrata expostos ao voriconazol, contribuindo assim para um melhor esclarecimento da sua elevada resistência. Para tal, foi inicialmente testada a suscetibilidade ao voriconazol de células plantónicas e de biofilmes de três estirpes de C. glabrata, em termos de viabilidade celular e biomassa. Posteriormente analisaram-se as matrizes de biofilmes expostos ao voriconazol, após a sua extração por sonicação, sendo o conteúdo proteico quantificado por um kit BCA®, o de polissacarídeos pelo método fenol-sulfúrico e o de ergosterol por HPLC. Os resultados mostraram diferente resistência ao voriconazol por parte dos biofilmes das três estirpes estudadas, o que não foi verificado em células plantónicas (CMI50 semelhante). Além disso, os resultados sugeriram maior produção de matriz pelos biofilmes mais resistentes e menor pelos menos resistentes. A análise das matrizes mostrou diminuição de proteínas e aumento de polissacarídeos nos biofilmes de todas as estirpes mas com extensão diferente. O aumento de polissacarídeos foi tanto maior quanto maior a perda de proteína, sugerindo uma possível compensação de conteúdo da matriz. O ergosterol, nunca antes referenciado como componente da matriz de biofilmes de Candida, apresentou aumento na presença de voriconazol, tanto maior quanto mais resistente se mostrou o biofilme dessa estirpe. O aumento de ergosterol e polissacarídeos nas matrizes dos biofilmes tratados com voriconazol poderá ser um indicativo de resposta pelos biofilmes para aumento da resistência antifúngica. Este trabalho contribuiu assim para uma melhor compreensão da composição da matriz de biofilmes de C. glabrata e possível relação com a resistência antifúngica. É importante que haja continuação do aumento deste conhecimento, o que poderá permitir a identificação de potenciais alvos terapêuticos que possibilitem a melhoria da eficácia antifúngica em biofilmes de C. glabrata e consequente diminuição da elevada mortalidade associada aos mesmos.
Autores principais:	Gonçalves, Bruna
Assunto:	Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias
Ano:	2013
País:	Portugal
Tipo de documento:	dissertação de mestrado
Tipo de acesso:	acesso aberto
Instituição associada:	Universidade do Minho
Idioma:	português
Origem:	RepositóriUM - Universidade do Minho

Descrição
Resumo:	As infeções causadas por espécies de Candida (candidíases) têm aumentado consideravelmente nas últimas décadas. Apesar da principal espécie causadora ser Candida albicans, recentemente, outras espécies de Candida têm surgido como patogénicos comuns, como Candida glabrata que é atualmente a segunda espécie mais frequente. Esta espécie é de elevada importância clínica uma vez que possui elevada resistência aos antifúngicos mais usados em prática clínica, como o fluconazol. Por tal, têm emergido triazóis de segunda geração como o voriconazol, com maior potência e atividade. A formação de biofilmes é um dos fatores de virulência que mais contribui para a patogenicidade das espécies de Candida, sendo aceite que a sua matriz desempenha um papel essencial na elevada resistência apresentada pelos mesmos. No entanto, há falta de conhecimento sobre a composição da matriz de biofilmes de C. glabrata e sobre o papel dessa composição na resistência antifúngica. O objetivo deste trabalho foi então, o estudo de compostos presentes na matriz de biofilmes de C. glabrata expostos ao voriconazol, contribuindo assim para um melhor esclarecimento da sua elevada resistência. Para tal, foi inicialmente testada a suscetibilidade ao voriconazol de células plantónicas e de biofilmes de três estirpes de C. glabrata, em termos de viabilidade celular e biomassa. Posteriormente analisaram-se as matrizes de biofilmes expostos ao voriconazol, após a sua extração por sonicação, sendo o conteúdo proteico quantificado por um kit BCA®, o de polissacarídeos pelo método fenol-sulfúrico e o de ergosterol por HPLC. Os resultados mostraram diferente resistência ao voriconazol por parte dos biofilmes das três estirpes estudadas, o que não foi verificado em células plantónicas (CMI50 semelhante). Além disso, os resultados sugeriram maior produção de matriz pelos biofilmes mais resistentes e menor pelos menos resistentes. A análise das matrizes mostrou diminuição de proteínas e aumento de polissacarídeos nos biofilmes de todas as estirpes mas com extensão diferente. O aumento de polissacarídeos foi tanto maior quanto maior a perda de proteína, sugerindo uma possível compensação de conteúdo da matriz. O ergosterol, nunca antes referenciado como componente da matriz de biofilmes de Candida, apresentou aumento na presença de voriconazol, tanto maior quanto mais resistente se mostrou o biofilme dessa estirpe. O aumento de ergosterol e polissacarídeos nas matrizes dos biofilmes tratados com voriconazol poderá ser um indicativo de resposta pelos biofilmes para aumento da resistência antifúngica. Este trabalho contribuiu assim para uma melhor compreensão da composição da matriz de biofilmes de C. glabrata e possível relação com a resistência antifúngica. É importante que haja continuação do aumento deste conhecimento, o que poderá permitir a identificação de potenciais alvos terapêuticos que possibilitem a melhoria da eficácia antifúngica em biofilmes de C. glabrata e consequente diminuição da elevada mortalidade associada aos mesmos.