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Anti-RAS1 and anti-RIM101 oligomers for controlling Candida albicans filamentation under different body fluids

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Detalhes bibliográficos
Resumo:Candida albicans continua a ser a espécie do género Candida responsável por maior número de infeções fúngicas em humanos. A patogenicidade de C. albicans está relacionada com a capacidade de transitar da forma de levedura para a forma filamentosa (dimorfismo). Esta transição de forma tem sido relacionada com alguns genes, entre eles RAS1 e RIM101. Assim, o principal objetivo deste trabalho, com base na terapia antisense (TA), foi desenvolver oligómeros antisense (OAS) capazes de reduzir a expressão genética dos genes RAS1 e RIM101. Pretende-se assim contribuir para o desenvolvimento de um cocktail de OAS capazes de controlar a filamentação de C. albicans em diferentes fluidos corporais humanos. Assim, como primeira tarefa avaliou-se a capacidade de filamentação de C. albicans em fluidos corporais humanos simulados, preparados a diferentes pH. Verificou-se que C. albicans é capaz de filamentar em saliva e urina artificial com diferentes valores de pH (4, 5.8 e 7), evidenciando a elevada capacidade de adaptabilidade e plasticidade de C. albicans em diferentes contextos ambientais. A segunda tarefa consistiu no desenho de dois OAS, o anti-RAS1 e o anti-RIM101, e na validação da sua funcionalidade in vitro. A ausência de citotoxidade de anti-RAS1 2'-OMethylRNA (2'OMe) e anti-RIM101 2'OMe, conjuntamente com a capacidade de reduzir a níveis significativos tanto a expressão dos genes RAS1 e RIM101, como a filamentação de C. albicans em diferentes fluidos corporais simulados, valida a aplicabilidade da TA no controlo da virulência de C. albicans. Assim, este trabalho reforça a possibilidade do desenvolvimento de novos antifúngicos a partir de um cocktail de OAS para o tratamento de candidíases.
Autores principais:Barbosa, Ana Teresa Moutinho
Assunto:Candidíases Formas filamentosas Mímicos de ácidos nucleicos Modificação 2'- OMethylRNA Candidiasis Filamentous forms Mimics of nucleic acids 2'-OMethylRNA modification Ciências Naturais::Ciências Biológicas
Ano:2021
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso aberto
Instituição associada:Universidade do Minho
Idioma:inglês
Origem:RepositóriUM - Universidade do Minho
Descrição
Resumo:Candida albicans continua a ser a espécie do género Candida responsável por maior número de infeções fúngicas em humanos. A patogenicidade de C. albicans está relacionada com a capacidade de transitar da forma de levedura para a forma filamentosa (dimorfismo). Esta transição de forma tem sido relacionada com alguns genes, entre eles RAS1 e RIM101. Assim, o principal objetivo deste trabalho, com base na terapia antisense (TA), foi desenvolver oligómeros antisense (OAS) capazes de reduzir a expressão genética dos genes RAS1 e RIM101. Pretende-se assim contribuir para o desenvolvimento de um cocktail de OAS capazes de controlar a filamentação de C. albicans em diferentes fluidos corporais humanos. Assim, como primeira tarefa avaliou-se a capacidade de filamentação de C. albicans em fluidos corporais humanos simulados, preparados a diferentes pH. Verificou-se que C. albicans é capaz de filamentar em saliva e urina artificial com diferentes valores de pH (4, 5.8 e 7), evidenciando a elevada capacidade de adaptabilidade e plasticidade de C. albicans em diferentes contextos ambientais. A segunda tarefa consistiu no desenho de dois OAS, o anti-RAS1 e o anti-RIM101, e na validação da sua funcionalidade in vitro. A ausência de citotoxidade de anti-RAS1 2'-OMethylRNA (2'OMe) e anti-RIM101 2'OMe, conjuntamente com a capacidade de reduzir a níveis significativos tanto a expressão dos genes RAS1 e RIM101, como a filamentação de C. albicans em diferentes fluidos corporais simulados, valida a aplicabilidade da TA no controlo da virulência de C. albicans. Assim, este trabalho reforça a possibilidade do desenvolvimento de novos antifúngicos a partir de um cocktail de OAS para o tratamento de candidíases.