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Avaliação in vitro da atividade anti-Leishmania de compostos sintéticos

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Resumo:A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada causada por protozoários do género Leishmania e transmitida aos hospedeiros vertebrados por vetores flebotomíneos. Está associada a taxas de morbidade e mortalidade global significativas, cujas estratégias atuais de controlo são principalmente baseadas na quimioterapia, que presentemente apresenta opções terapêuticas limitadas com elevada toxicidade, eficácia decrescente e resistência crescente, tornando cada vez mais relevante a procura de compostos com atividade anti-Leishmania que sejam de fácil administração, seletivos e com elevado índice terapêutico. No presente trabalho foram realizados ensaios in vitro com peróxidos sintéticos - 6 trioxolanos, 6 tetraoxanos e 4 derivados de artemisinina - em diferentes concentrações, para avaliar a atividade leishmanicida. Destes, foram selecionados os que apresentaram menor CI50 contra as formas promastigotas de Leishmania infantum (MHOM/PT/88/IMT151), Leishmania donovani (MHOM/BD/2006/BD14) e Leishmania tropica (MHOM/PS/2002/63jnF21) e foram submetidos a testes contra as formas amastigotas intracelulares. A anfotericina B, miltefosina e a pentamidina foram usadas como controle positivo. Também foi avaliada a citotoxicidade dos compostos em linhagens de células monocíticas/ macrofágicas J774.A1 e THP-1, utilizando o método colorimétrico com metil-tiazol-tetrazólio (MTT). Os resultados demonstraram que a maioria dos compostos pesquisados apresentaram baixa citotoxicidade contra as linhas celulares em estudo e níveis variados de ação leishmanicida contra as formas promastigotas e amastigotas das diferentes espécies, sendo que, no entanto, a forma amastigota se apresentou mais sensível aos compostos testados. Observou-se que em concentrações micromolares o tetraoxano LC138 demonstrou uma melhor atividade contra as formas amastigotas intracelulares de L. infantum (CI50 = 23,19 μM), apresentando um índice de seletividade de 22,8 o que indica ser este um composto promissor para estudos adicionais. Foi também avaliado o efeito dos compostos LC132, LC137 e LC138 na morfologia das formas promastigotas de L. infantum, observando-se alterações no tamanho do flagelo, tamanho médio e desorganização citoplasmática.
Autores principais:MENDES, Andreia Patrícia Moreira Mendes
Assunto:Biologia molecular Ciencias biomédicas Leishmania spp Atividade anti-Leishmania in vitro Compostos peroxídicos sintéticos MTT Análise morfométrica
Ano:2019
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso aberto
Instituição associada:Universidade Nova de Lisboa
Idioma:português
Origem:Repositório Institucional da UNL
Descrição
Resumo:A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada causada por protozoários do género Leishmania e transmitida aos hospedeiros vertebrados por vetores flebotomíneos. Está associada a taxas de morbidade e mortalidade global significativas, cujas estratégias atuais de controlo são principalmente baseadas na quimioterapia, que presentemente apresenta opções terapêuticas limitadas com elevada toxicidade, eficácia decrescente e resistência crescente, tornando cada vez mais relevante a procura de compostos com atividade anti-Leishmania que sejam de fácil administração, seletivos e com elevado índice terapêutico. No presente trabalho foram realizados ensaios in vitro com peróxidos sintéticos - 6 trioxolanos, 6 tetraoxanos e 4 derivados de artemisinina - em diferentes concentrações, para avaliar a atividade leishmanicida. Destes, foram selecionados os que apresentaram menor CI50 contra as formas promastigotas de Leishmania infantum (MHOM/PT/88/IMT151), Leishmania donovani (MHOM/BD/2006/BD14) e Leishmania tropica (MHOM/PS/2002/63jnF21) e foram submetidos a testes contra as formas amastigotas intracelulares. A anfotericina B, miltefosina e a pentamidina foram usadas como controle positivo. Também foi avaliada a citotoxicidade dos compostos em linhagens de células monocíticas/ macrofágicas J774.A1 e THP-1, utilizando o método colorimétrico com metil-tiazol-tetrazólio (MTT). Os resultados demonstraram que a maioria dos compostos pesquisados apresentaram baixa citotoxicidade contra as linhas celulares em estudo e níveis variados de ação leishmanicida contra as formas promastigotas e amastigotas das diferentes espécies, sendo que, no entanto, a forma amastigota se apresentou mais sensível aos compostos testados. Observou-se que em concentrações micromolares o tetraoxano LC138 demonstrou uma melhor atividade contra as formas amastigotas intracelulares de L. infantum (CI50 = 23,19 μM), apresentando um índice de seletividade de 22,8 o que indica ser este um composto promissor para estudos adicionais. Foi também avaliado o efeito dos compostos LC132, LC137 e LC138 na morfologia das formas promastigotas de L. infantum, observando-se alterações no tamanho do flagelo, tamanho médio e desorganização citoplasmática.