Publicação
Caracterização dos efeitos provocados pela acumulação de S-Adenosil-Homocisteína envolvidos na biodisponibilidade de óxido nítrico
| Resumo: | A doença vascular, nos países ditos industrializados, constitui a principal causa de mortalidade e morbilidade. Recentemente foi sugerido o possível envolvimento de alterações epigenéticas na toxicidade vascular observada em situações de hiper-homocisteinémia (HHcy), promovidas pela acumulação intracelular do precursor da homocisteína: a S-adenosil-homocisteína (SAH). No presente estudo procurou esclarecer-se o efeito da acumulação intracelular de SAH na expressão dos genes envolvidos na biodisponibilidade da principal molécula anti-trombótica endógena - o óxido nítrico (NO). Foi estudada a expressão da enzima responsável pela síntese de NO, a sintase de óxido nítrico endotelial (eNOS) e das enzimas envolvidas no metabolismo do seu inibidor endógeno - a dimetilarginina assimétrica. Foi ainda analisada a proteína responsável pela inibição da eNOS, essencialmente ao nível cavéolar - Caveolin-1 (Cav-1). Como modelo de estudo foram utilizadas culturas de células endoteliais humanas isoladas da veia de cordão umbilical, nas quais a acumulação intracelular de SAH foi conseguida através da manipulação do metabolismo da homocisteína. Os resultados obtidos mostram que o estado de hipometilação induzido pela acumulação de SAH foi responsável pelo aumento da transcrição de todos os genes estudados. No entanto, ao nível da tradução, foram observadas alterações significativas apenas para a expressão das proteínas: eNOS e Cav-1, nomeadamente, uma diminuição e aumento, respectivamente. O contraste entre a diminuição da expressão de eNOS e o aumento de Cav-1 sugere que a diminuição da produção de NO observada poderá resultar de um aumento de Cav-1, a qual, para além de exercer um efeito inibitório sobre a eNOS ao nível membranar e citosólico, poderá ainda contribuir para uma degradação ou translocação subcelular da enzima. Assim, o mecanismo proposto poderá contribuir para a elucidação do binómio HHcy-doença vascular, e futuramente, possibilitar o desenvolvimento estratégias terapêutico-preventivas que permitam a redução da incidência da principal causa de morte, a doença cardiovascular. |
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| Autores principais: | Barroso, Maria Madalena H. Serras Vicente |
| Assunto: | Biologia molecular Óxido nítrico Doença vascular Técnicas biológicas Teses de mestrado |
| Ano: | 2009 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | A doença vascular, nos países ditos industrializados, constitui a principal causa de mortalidade e morbilidade. Recentemente foi sugerido o possível envolvimento de alterações epigenéticas na toxicidade vascular observada em situações de hiper-homocisteinémia (HHcy), promovidas pela acumulação intracelular do precursor da homocisteína: a S-adenosil-homocisteína (SAH). No presente estudo procurou esclarecer-se o efeito da acumulação intracelular de SAH na expressão dos genes envolvidos na biodisponibilidade da principal molécula anti-trombótica endógena - o óxido nítrico (NO). Foi estudada a expressão da enzima responsável pela síntese de NO, a sintase de óxido nítrico endotelial (eNOS) e das enzimas envolvidas no metabolismo do seu inibidor endógeno - a dimetilarginina assimétrica. Foi ainda analisada a proteína responsável pela inibição da eNOS, essencialmente ao nível cavéolar - Caveolin-1 (Cav-1). Como modelo de estudo foram utilizadas culturas de células endoteliais humanas isoladas da veia de cordão umbilical, nas quais a acumulação intracelular de SAH foi conseguida através da manipulação do metabolismo da homocisteína. Os resultados obtidos mostram que o estado de hipometilação induzido pela acumulação de SAH foi responsável pelo aumento da transcrição de todos os genes estudados. No entanto, ao nível da tradução, foram observadas alterações significativas apenas para a expressão das proteínas: eNOS e Cav-1, nomeadamente, uma diminuição e aumento, respectivamente. O contraste entre a diminuição da expressão de eNOS e o aumento de Cav-1 sugere que a diminuição da produção de NO observada poderá resultar de um aumento de Cav-1, a qual, para além de exercer um efeito inibitório sobre a eNOS ao nível membranar e citosólico, poderá ainda contribuir para uma degradação ou translocação subcelular da enzima. Assim, o mecanismo proposto poderá contribuir para a elucidação do binómio HHcy-doença vascular, e futuramente, possibilitar o desenvolvimento estratégias terapêutico-preventivas que permitam a redução da incidência da principal causa de morte, a doença cardiovascular. |
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