Publicação

Regulação do factor de transcrição NrF2 pelo peróxido de hidrogénio em células Hela

Detalhes bibliográficos
Resumo:	O modelo de activação do sistema NrF2/Keap1 ainda não se encontra bem elucidado, havendo inconsistência no que toca ao mecanismo de activação da proteína NrF2. A hipótese estabelecida na literatura é que uma activação do sistema passa pelo dissociar do complexo NrF2-Keap1 em resposta a estímulos indutores do sistema. Porém encontram-se igualmente registadas observações que suportam que uma activação do sistema NrF2/Keap1 passa pela acumulação da proteína NrF2 por síntese de novo e uma ineficiente degradação proteossomal da mesma por saturação da proteína Keap1. Ainda é de salientar que a maioria dos estudos de activação do NrF2 são realizados pela exposição a fármacos e/ou concentrações de H2O2 elevadas (~10-3 M), condições que não mimetizam a sinalização via H2O2 observada in vivo (10-7 a 10-9 M) e por recurso à sobreexpressão da proteína NrF2. Neste trabalho praticaram-se condições próximas das fisiológicas e não se recorreu à sobreexpressão das proteínas NrF2 e/ou Keap1, o que aproxima o presente trabalho das condições fisiológicas. Concluiu-se que o sistema NrF2/Keap1 comporta-se de maneira distinta consoante o método de exposição ao H2O2 empregue. Por adição bolus (50 e 100 μM) observou-se somente um aumento dos níveis nucleares da proteína NrF2, enquanto em exposição por estado estacionário (12,5 μM) observou-se um aumento dos níveis citosólicos da proteína NrF2 anterior ao aumento do nível nuclear da mesma. Ainda se observou por imunofluorescência, que a proteína NrF2 em condições basais apresenta baixos níveis citosólicos. Também se observou que uma exposição prolongada (4 horas) a 12,5 μM H2O2 em estado estacionário conduziu a uma terminação da activação do sistema NrF2/Keap1. Finalmente, sugere-se que o mesmo sistema participe no processo de adaptação ao stress oxidativo em células HeLa.
Autores principais:	Covas, Gonçalo Neff Valadares Gomes
Assunto:	H2O2 Adaptação Estado estacionário Teses de mestrado - 2011
Ano:	2011
País:	Portugal
Tipo de documento:	dissertação de mestrado
Tipo de acesso:	acesso aberto
Instituição associada:	Universidade de Lisboa
Idioma:	português
Origem:	Repositório da Universidade de Lisboa

Descrição
Resumo:	O modelo de activação do sistema NrF2/Keap1 ainda não se encontra bem elucidado, havendo inconsistência no que toca ao mecanismo de activação da proteína NrF2. A hipótese estabelecida na literatura é que uma activação do sistema passa pelo dissociar do complexo NrF2-Keap1 em resposta a estímulos indutores do sistema. Porém encontram-se igualmente registadas observações que suportam que uma activação do sistema NrF2/Keap1 passa pela acumulação da proteína NrF2 por síntese de novo e uma ineficiente degradação proteossomal da mesma por saturação da proteína Keap1. Ainda é de salientar que a maioria dos estudos de activação do NrF2 são realizados pela exposição a fármacos e/ou concentrações de H2O2 elevadas (~10-3 M), condições que não mimetizam a sinalização via H2O2 observada in vivo (10-7 a 10-9 M) e por recurso à sobreexpressão da proteína NrF2. Neste trabalho praticaram-se condições próximas das fisiológicas e não se recorreu à sobreexpressão das proteínas NrF2 e/ou Keap1, o que aproxima o presente trabalho das condições fisiológicas. Concluiu-se que o sistema NrF2/Keap1 comporta-se de maneira distinta consoante o método de exposição ao H2O2 empregue. Por adição bolus (50 e 100 μM) observou-se somente um aumento dos níveis nucleares da proteína NrF2, enquanto em exposição por estado estacionário (12,5 μM) observou-se um aumento dos níveis citosólicos da proteína NrF2 anterior ao aumento do nível nuclear da mesma. Ainda se observou por imunofluorescência, que a proteína NrF2 em condições basais apresenta baixos níveis citosólicos. Também se observou que uma exposição prolongada (4 horas) a 12,5 μM H2O2 em estado estacionário conduziu a uma terminação da activação do sistema NrF2/Keap1. Finalmente, sugere-se que o mesmo sistema participe no processo de adaptação ao stress oxidativo em células HeLa.