Publicação
Inibição do HIV-1 por fragmentos de anticorpos sintéticos
| Resumo: | A proteína transmembranar gp41 medeia a entrada do HIV-1 na célula hospedeira, conjuntamente com a glicoproteína de superfície gp120. A interacção desta com o receptor celular CD4 induz alterações conformacionais no ectodomínio da g41 (conformação de pré-fusão) que colapsam na fusão da membrana celular e do invólucro viral, através da formação de uma conformação fusogénica. Diferentes classes de fármacos anti-retrovirais encontram-se disponíveis no mercado, constituindo o enfuvirtide o único péptido inibidor de fusão aprovado pela FDA. O objectivo deste trabalho consistia no bloqueio das alterações conformacionais que ocorrem no ectodomínio da gp41 durante o processo de fusão do HIV-1 e da célula-alvo. Este bloqueio pretendia-se que fosse efectuado pela ligação de single domain VL antibodies, formatos de anticorpos de reduzida massa molecular, ao ectodomínio da gp41 e em particular a uma região deste, a região em α-hélice HR1. Esta é conservada entre os diferentes isolados do HIV-1 e imprescindível para a formação da conformação fusogénica, o que consequentemente a torna numa região com um papel crítico na entrada do HIV-1 na célula hospedeira. Os single domain antibodies foram seleccionados pela tecnologia de phage display a partir de uma biblioteca sintética, em que as ansas CDR1 e CDR3 originais foram substituídas por regiões de vinte e dois aminoácidos. Doze destes sendo aleatoriamente serinas, alaninas, aspartatos ou tirosinas e os restantes dez sendo serinas e glicinas que providenciaram flexibilidade às ansas. A partir da biblioteca sintética foram isolados cinco single domain antibodies inibidores em cerca de 20% da infecciosidade do HIV-1 em células TZM-bL, sendo dois destes específicos para a região HR1. Os single domain VL antibodies apresentam-se deste modo como promissores agentes terapêuticos na inibição da infecção pelo HIV-1, como uma alternativa às classes de anti-retrovirais existentes. |
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| Autores principais: | Santos, Ana Catarina Cunha |
| Assunto: | Imunologia HIV-1 Terapêutica Teses de mestrado - 2009 |
| Ano: | 2009 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso restrito |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | A proteína transmembranar gp41 medeia a entrada do HIV-1 na célula hospedeira, conjuntamente com a glicoproteína de superfície gp120. A interacção desta com o receptor celular CD4 induz alterações conformacionais no ectodomínio da g41 (conformação de pré-fusão) que colapsam na fusão da membrana celular e do invólucro viral, através da formação de uma conformação fusogénica. Diferentes classes de fármacos anti-retrovirais encontram-se disponíveis no mercado, constituindo o enfuvirtide o único péptido inibidor de fusão aprovado pela FDA. O objectivo deste trabalho consistia no bloqueio das alterações conformacionais que ocorrem no ectodomínio da gp41 durante o processo de fusão do HIV-1 e da célula-alvo. Este bloqueio pretendia-se que fosse efectuado pela ligação de single domain VL antibodies, formatos de anticorpos de reduzida massa molecular, ao ectodomínio da gp41 e em particular a uma região deste, a região em α-hélice HR1. Esta é conservada entre os diferentes isolados do HIV-1 e imprescindível para a formação da conformação fusogénica, o que consequentemente a torna numa região com um papel crítico na entrada do HIV-1 na célula hospedeira. Os single domain antibodies foram seleccionados pela tecnologia de phage display a partir de uma biblioteca sintética, em que as ansas CDR1 e CDR3 originais foram substituídas por regiões de vinte e dois aminoácidos. Doze destes sendo aleatoriamente serinas, alaninas, aspartatos ou tirosinas e os restantes dez sendo serinas e glicinas que providenciaram flexibilidade às ansas. A partir da biblioteca sintética foram isolados cinco single domain antibodies inibidores em cerca de 20% da infecciosidade do HIV-1 em células TZM-bL, sendo dois destes específicos para a região HR1. Os single domain VL antibodies apresentam-se deste modo como promissores agentes terapêuticos na inibição da infecção pelo HIV-1, como uma alternativa às classes de anti-retrovirais existentes. |
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