Publicação
Disseminação de determinantes genéticos de resistência em isolados clínicos de três unidades hospitalares de Lisboa
| Resumo: | A ocorrência de infeções causadas por bactérias resistentes aos antibióticos β-lactâmicos tem aumentado significativamente nos últimos anos em bactérias da família Enterobacteriaceae, principalmente em algumas espécies como Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae. Estas infeções são particularmente preocupantes em ambiente hospitalar, onde se encontram indivíduos mais suscetíveis à infeção. Este estudo teve como principal objetivo compreender os mecanismos envolvidos na disseminação de estirpes bacterianas multirresistentes e identificar possíveis reservatórios que permitem a perpetuação das mesmas em ambiente hospitalar. O estudo incidiu principalmente sobre 26 isolados de K. pneumoniae e 7 isolados E. coli provenientes de diferentes amostras recolhidas de doentes de três unidades hospitalares de Lisboa que englobam o Centro Hospitalar de Lisboa Ocidental (CHLO). Determinou-se o perfil de suscetibilidade dos isolados aos antibióticos, genes de resistência e ambiente genético dos mesmos, estabeleceu-se uma relação clonal entre os isolados por determinação da sequence type (ST), e estudaram-se os mecanismos envolvidos na transferência horizontal de genes através de técnicas de transferência genética como conjugação e transformação por eletroporação. Entre os isolados de E. coli, 4 eram produtores de uma carbapenemase KPC-2, variante mais comum entre as enzimas da família KPC, frequentemente associadas a isolados de K. pneumoniae. Este gene de resistência foi identificado num plasmídeo de aproximadamente 9 kb pertencente ao grupo de incompatibilidade IncF que foi transferido por eletroporação para a estirpe de E. coli JM109, demonstrando o papel deste plasmídeo na disseminação do gene de resistência blaKPC-2. Foi também identificada a sequência de inserção ISKpn6 a jusante do gene blaKPC-2, sequência que faz parte de um transposão Tn4401 associado à disseminação mundial destes genes. Verificou-se ainda que estes isolados pertencem à ST131, clone pandémico de E. coli descrito como sendo responsável pela disseminação da enzima CTX-M-15. Dos isolados de K. pneumoniae estudados, 19 eram produtores de uma β-lactamase de espectro alargado CTX-M-15, a β-lactamase de espectro alargado (ESBL) mais disseminada em todo o mundo. Dos 6 isolados para os quais se determinou a ST, identificou-se a ST15 em 5 isolados, um dos STs mais prevalentes em K. pneumoniae produtoras de enzimas da família CTX-M. Identificaram-se ainda as sequências de inserção ISEcp1 e IS903 a montante e a jusante do gene blaCTX-M-15, respetivamente, sequências que desempenham um papel importante na mobilização deste gene. Este estudo demonstrou a existência de disseminação intra- e inter-hospitalar de organismos produtores de ESBLs que pode ser explicada pela facilidade de aquisição de elementos genéticos móveis contendo os genes de resistência e pela sua propagação em clones específicos. Torna-se urgente a implementação de medidas de controlo e prevenção de disseminação destes organismos. |
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| Autores principais: | Costa, Joana Filipa Cerqueira, 1990- |
| Assunto: | Infecções hospitalares Resistência aos antibióticos Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Teses de mestrado - 2013 |
| Ano: | 2013 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | A ocorrência de infeções causadas por bactérias resistentes aos antibióticos β-lactâmicos tem aumentado significativamente nos últimos anos em bactérias da família Enterobacteriaceae, principalmente em algumas espécies como Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae. Estas infeções são particularmente preocupantes em ambiente hospitalar, onde se encontram indivíduos mais suscetíveis à infeção. Este estudo teve como principal objetivo compreender os mecanismos envolvidos na disseminação de estirpes bacterianas multirresistentes e identificar possíveis reservatórios que permitem a perpetuação das mesmas em ambiente hospitalar. O estudo incidiu principalmente sobre 26 isolados de K. pneumoniae e 7 isolados E. coli provenientes de diferentes amostras recolhidas de doentes de três unidades hospitalares de Lisboa que englobam o Centro Hospitalar de Lisboa Ocidental (CHLO). Determinou-se o perfil de suscetibilidade dos isolados aos antibióticos, genes de resistência e ambiente genético dos mesmos, estabeleceu-se uma relação clonal entre os isolados por determinação da sequence type (ST), e estudaram-se os mecanismos envolvidos na transferência horizontal de genes através de técnicas de transferência genética como conjugação e transformação por eletroporação. Entre os isolados de E. coli, 4 eram produtores de uma carbapenemase KPC-2, variante mais comum entre as enzimas da família KPC, frequentemente associadas a isolados de K. pneumoniae. Este gene de resistência foi identificado num plasmídeo de aproximadamente 9 kb pertencente ao grupo de incompatibilidade IncF que foi transferido por eletroporação para a estirpe de E. coli JM109, demonstrando o papel deste plasmídeo na disseminação do gene de resistência blaKPC-2. Foi também identificada a sequência de inserção ISKpn6 a jusante do gene blaKPC-2, sequência que faz parte de um transposão Tn4401 associado à disseminação mundial destes genes. Verificou-se ainda que estes isolados pertencem à ST131, clone pandémico de E. coli descrito como sendo responsável pela disseminação da enzima CTX-M-15. Dos isolados de K. pneumoniae estudados, 19 eram produtores de uma β-lactamase de espectro alargado CTX-M-15, a β-lactamase de espectro alargado (ESBL) mais disseminada em todo o mundo. Dos 6 isolados para os quais se determinou a ST, identificou-se a ST15 em 5 isolados, um dos STs mais prevalentes em K. pneumoniae produtoras de enzimas da família CTX-M. Identificaram-se ainda as sequências de inserção ISEcp1 e IS903 a montante e a jusante do gene blaCTX-M-15, respetivamente, sequências que desempenham um papel importante na mobilização deste gene. Este estudo demonstrou a existência de disseminação intra- e inter-hospitalar de organismos produtores de ESBLs que pode ser explicada pela facilidade de aquisição de elementos genéticos móveis contendo os genes de resistência e pela sua propagação em clones específicos. Torna-se urgente a implementação de medidas de controlo e prevenção de disseminação destes organismos. |
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