Publicação
Hormonas naturais e de síntese, bisfenol A, octilfenol e nonilfenol em águas para consumo humano:optimização do método de análise por SPE-LC-ESI-MS/MS
| Resumo: | O objectivo deste trabalho consistiu na optimização de um método de ensaio para análise de compostos desreguladores endócrinos em águas para consumo humano. Os compostos estudados abrangem a classe das hormonas naturais (estriol, estrona, 17-estradiol e progesterona), das hormonas de síntese (etinilestradiol, dietilestilbestrol e mestranol), e dos compostos fenólicos (bisfenol A, octilfenol e nonilfenol).O presente trabalho apresenta uma breve introdução à EPAL (Empresa Portuguesa das Águas Livres, S.A.), como entidade abastecedora de água na cidade de Lisboa, faz o enquadramento legal e ambiental da temática dos desreguladores endócrinos e apresenta os principais conceitos relacionados com o sistema endócrino.Devido às características dos compostos em análise, nomeadamente a polaridade média a elevada e as quantidades vestigiais presentes nas matrizes ambientais, implementou-se e validou-se o método de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa (tandem), com ionização por electrospray, utilizando como técnica de extracção/pré-concentração a extracção em fase sólida, SPE-LC-ESI-MS/MS.A optimização do método de ensaio, teve como ponto de partida a determinação das melhores condições de formação do ião precursor para cada desregulador endócrino, tendo-se utilizado o electrospray como método de ionização, em modo positivo e negativo. Nesta fase foram optimizados outros parâmetros relacionados com o método de ionização, tais como a voltagem do capilar e a voltagem de cone. Estabelecidas as condições de formação do ião precursor para cada analito, foram optimizados diversos parâmetros do analisador (triplo quadrupolo), em modo MRM (Multiple Reaction Monitoring), de forma a definir duas transições ião precursor/ião produto. Para cada composto foi estabelecida uma transição de quantificação (MRM1) e uma transição de qualificação (MRM2) com o objectivo de aumentar a selectividade, bem como a sensibilidade na quantificação destes compostos em concentrações vestigiais nas amostras de água.Após definidas as condições cromatográficas, iniciou-se a optimização das condições de extracção em fase sólida, como técnica de preparação da amostra. Nesta fase foram testados diferentes solventes de eluição e diferentes tipos de cartucho, e foram optimizadas as condições operacionais, nomeadamente, a secagem do cartucho, o fluxo de passagem da amostra e a etapa de concentração do eluído.O método SPE-LC-ESI-MS/MS foi validado para os compostos em estudo, através da aplicação de diversos testes estatísticos que permitiram definir o intervalo de linearidade, a gama de trabalho, os limiares analíticos, a precisão, o efeito de matriz e a estimativa da incerteza do método de ensaio.O método validado foi aplicado à análise de amostras representativas dos diversos pontos de colheita da EPAL, com o objectivo de avaliar os diferentes tipos de água captada e distribuída por esta empresa gestora de água, no que respeita à presença dos compostos em estudo. |
|---|---|
| Autores principais: | Henriques, Marta Luísa Guerreiro dos Santos |
| Assunto: | Hidrologia Cromatografia líquida Espectrometria de massa Teses de mestrado |
| Ano: | 2008 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | O objectivo deste trabalho consistiu na optimização de um método de ensaio para análise de compostos desreguladores endócrinos em águas para consumo humano. Os compostos estudados abrangem a classe das hormonas naturais (estriol, estrona, 17-estradiol e progesterona), das hormonas de síntese (etinilestradiol, dietilestilbestrol e mestranol), e dos compostos fenólicos (bisfenol A, octilfenol e nonilfenol).O presente trabalho apresenta uma breve introdução à EPAL (Empresa Portuguesa das Águas Livres, S.A.), como entidade abastecedora de água na cidade de Lisboa, faz o enquadramento legal e ambiental da temática dos desreguladores endócrinos e apresenta os principais conceitos relacionados com o sistema endócrino.Devido às características dos compostos em análise, nomeadamente a polaridade média a elevada e as quantidades vestigiais presentes nas matrizes ambientais, implementou-se e validou-se o método de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa (tandem), com ionização por electrospray, utilizando como técnica de extracção/pré-concentração a extracção em fase sólida, SPE-LC-ESI-MS/MS.A optimização do método de ensaio, teve como ponto de partida a determinação das melhores condições de formação do ião precursor para cada desregulador endócrino, tendo-se utilizado o electrospray como método de ionização, em modo positivo e negativo. Nesta fase foram optimizados outros parâmetros relacionados com o método de ionização, tais como a voltagem do capilar e a voltagem de cone. Estabelecidas as condições de formação do ião precursor para cada analito, foram optimizados diversos parâmetros do analisador (triplo quadrupolo), em modo MRM (Multiple Reaction Monitoring), de forma a definir duas transições ião precursor/ião produto. Para cada composto foi estabelecida uma transição de quantificação (MRM1) e uma transição de qualificação (MRM2) com o objectivo de aumentar a selectividade, bem como a sensibilidade na quantificação destes compostos em concentrações vestigiais nas amostras de água.Após definidas as condições cromatográficas, iniciou-se a optimização das condições de extracção em fase sólida, como técnica de preparação da amostra. Nesta fase foram testados diferentes solventes de eluição e diferentes tipos de cartucho, e foram optimizadas as condições operacionais, nomeadamente, a secagem do cartucho, o fluxo de passagem da amostra e a etapa de concentração do eluído.O método SPE-LC-ESI-MS/MS foi validado para os compostos em estudo, através da aplicação de diversos testes estatísticos que permitiram definir o intervalo de linearidade, a gama de trabalho, os limiares analíticos, a precisão, o efeito de matriz e a estimativa da incerteza do método de ensaio.O método validado foi aplicado à análise de amostras representativas dos diversos pontos de colheita da EPAL, com o objectivo de avaliar os diferentes tipos de água captada e distribuída por esta empresa gestora de água, no que respeita à presença dos compostos em estudo. |
|---|