Publicação
Lisinas codificadas por profagos de Acinetobacter baumannii
| Resumo: | Acinetobacter baumannii é um agente patogénico Gram-negativo, oportunista e responsável pela maioria das infeções nosocomiais em todo o mundo. Nos últimos anos, este microrganismo tem adquirido resistência aos diversos antibióticos comercializados, sendo maioritariamente auxiliado pelos seus fatores de virulência, pela excelente capacidade de resistir à dessecação, desinfeção e stress oxidativo, pela capacidade de formar biofilmes, por se mover pelas superfícies e por ser capaz de adquirir DNA exógeno. Particularmente, A. baumannii resistente a carbapenemos (CRAB), foi decretado pela Organização Mundial de Saúde (OMS) como um microrganismo prioritário que requer atenção e o desenvolvimento imperativo de novas opções terapêuticas. As (endo)lisinas fágicas apresentam-se como uma opção promissora, uma vez que são responsáveis por clivar as ligações no peptidoglicano a partir do interior, levando à lise das células hospedeiras durante o ciclo lítico do fago. Sabe-se que a aplicação de endolisinas a partir do exterior e diretamente em bactérias Gram-positivas provoca a sua lise e que, teoricamente, o mesmo não é esperado quando aplicadas em bactérias Gram-negativas devido à presença da membrana externa. Esta barreira poderá ser ultrapassada através da encapsulação das endolisinas em lipossomas, tirando partido da fusão desta estrutura com a membrana externa da bactéria. Contrariamente ao expectável, já foram relatadas algumas lisinas com atividade bactericida intrínseca direta contra A. baumannii. Os profagos (genomas fágicos integrados) em genomas de A. baumannii constituem uma fonte acessível para a pesquisa destas proteínas. Da análise dos 199 genomas de A. baumannii considerados neste projeto, foram detetados 373 profagos putativos e 311 lisinas putativas codificadas na totalidade das regiões profágicas identificadas. As lisinas selecionadas, AbCWH, AbLyso, AbPepti, AbProte e AbTail, foram clonadas e expressas com sucesso tendo todas apresentado atividade bactericida contra a bactéria Gram-positiva Micrococcus luteus. Em particular, AbTail apresentou atividade direta contra A. baumannii sendo a sua estrutura alvo de análise. |
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| Autores principais: | Silva, Maria Leonor Raposo Vieira da |
| Assunto: | Acinetobacter baumannii resistência a antibióticos profagos (endo)lisinas lise a partir do exterior Teses de mestrado - 2023 |
| Ano: | 2023 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso embargado |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | Acinetobacter baumannii é um agente patogénico Gram-negativo, oportunista e responsável pela maioria das infeções nosocomiais em todo o mundo. Nos últimos anos, este microrganismo tem adquirido resistência aos diversos antibióticos comercializados, sendo maioritariamente auxiliado pelos seus fatores de virulência, pela excelente capacidade de resistir à dessecação, desinfeção e stress oxidativo, pela capacidade de formar biofilmes, por se mover pelas superfícies e por ser capaz de adquirir DNA exógeno. Particularmente, A. baumannii resistente a carbapenemos (CRAB), foi decretado pela Organização Mundial de Saúde (OMS) como um microrganismo prioritário que requer atenção e o desenvolvimento imperativo de novas opções terapêuticas. As (endo)lisinas fágicas apresentam-se como uma opção promissora, uma vez que são responsáveis por clivar as ligações no peptidoglicano a partir do interior, levando à lise das células hospedeiras durante o ciclo lítico do fago. Sabe-se que a aplicação de endolisinas a partir do exterior e diretamente em bactérias Gram-positivas provoca a sua lise e que, teoricamente, o mesmo não é esperado quando aplicadas em bactérias Gram-negativas devido à presença da membrana externa. Esta barreira poderá ser ultrapassada através da encapsulação das endolisinas em lipossomas, tirando partido da fusão desta estrutura com a membrana externa da bactéria. Contrariamente ao expectável, já foram relatadas algumas lisinas com atividade bactericida intrínseca direta contra A. baumannii. Os profagos (genomas fágicos integrados) em genomas de A. baumannii constituem uma fonte acessível para a pesquisa destas proteínas. Da análise dos 199 genomas de A. baumannii considerados neste projeto, foram detetados 373 profagos putativos e 311 lisinas putativas codificadas na totalidade das regiões profágicas identificadas. As lisinas selecionadas, AbCWH, AbLyso, AbPepti, AbProte e AbTail, foram clonadas e expressas com sucesso tendo todas apresentado atividade bactericida contra a bactéria Gram-positiva Micrococcus luteus. Em particular, AbTail apresentou atividade direta contra A. baumannii sendo a sua estrutura alvo de análise. |
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