Publicação
A levedura como sistema modelo no estudo de compostos químicos: caso de estudo da fibrose quística
| Resumo: | A Fibrose Quística é uma doença autossómica recessiva causada por mutações que resultam na redução da atividade ou expressão da proteína cystic fibrosis transmembrane conductance regulator na superfície das células. Desde a última década tem-se constatado avanços significativos na terapêutica farmacológica desta doença multissistémica, particularmente na utilização de pequenas moléculas que atuam diretamente na proteína CFTR, fisiopatologicamente responsável pela doença. O mecanismo de ação destes fármacos é ainda discutido e não se encontra completamente descrito. Para além disso, a combinação de leveduras com os novos moduladores da Fibrose Quística não foi ainda documentada. Deste modo, esta investigação tem como principal objetivo avaliar o impacto dos fármacos tezacaftor (VX-661), ivacaftor (VX-770) e lumacaftor (VX-809) na levedura Saccharomyces cerevisiae, através da caracterização do citoesqueleto (actina-F e microtúbulos). O impacto destes fármacos foi testado numa estirpe selvagem (BY4742) e numa estirpe derivada isogénica. Relativamente à distribuição de microtúbulos, não foi identificado um efeito após exposição aos compostos, o que sugere a ausência de um impacto sobre o ciclo celular da levedura. Adicionalmente, constatámos um efeito na distribuição da actina-F nas células de uma colónia de estirpe selvagem expostas a VX-770 e VX-809, tendo-se observado despolarização de patches e cabos e uma redução do número de cabos no córtex celular. Estes resultados podem indicar uma resposta ao stress mediada pela actina-F, sendo necessárias experiências adicionais para testar esta hipótese. No que diz respeito ao efeito dos compostos sobre a estirpe isogénica, não foi possível obter resultados reprodutíveis devido ao pequeno número de colónias e à variabilidade de crescimento após a transformação. |
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| Autores principais: | Silva, Inês Coitos da |
| Assunto: | Fibrose quística VX Levedura actina-F Microtúbulos Teses de mestrado - 2020 |
| Ano: | 2020 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | A Fibrose Quística é uma doença autossómica recessiva causada por mutações que resultam na redução da atividade ou expressão da proteína cystic fibrosis transmembrane conductance regulator na superfície das células. Desde a última década tem-se constatado avanços significativos na terapêutica farmacológica desta doença multissistémica, particularmente na utilização de pequenas moléculas que atuam diretamente na proteína CFTR, fisiopatologicamente responsável pela doença. O mecanismo de ação destes fármacos é ainda discutido e não se encontra completamente descrito. Para além disso, a combinação de leveduras com os novos moduladores da Fibrose Quística não foi ainda documentada. Deste modo, esta investigação tem como principal objetivo avaliar o impacto dos fármacos tezacaftor (VX-661), ivacaftor (VX-770) e lumacaftor (VX-809) na levedura Saccharomyces cerevisiae, através da caracterização do citoesqueleto (actina-F e microtúbulos). O impacto destes fármacos foi testado numa estirpe selvagem (BY4742) e numa estirpe derivada isogénica. Relativamente à distribuição de microtúbulos, não foi identificado um efeito após exposição aos compostos, o que sugere a ausência de um impacto sobre o ciclo celular da levedura. Adicionalmente, constatámos um efeito na distribuição da actina-F nas células de uma colónia de estirpe selvagem expostas a VX-770 e VX-809, tendo-se observado despolarização de patches e cabos e uma redução do número de cabos no córtex celular. Estes resultados podem indicar uma resposta ao stress mediada pela actina-F, sendo necessárias experiências adicionais para testar esta hipótese. No que diz respeito ao efeito dos compostos sobre a estirpe isogénica, não foi possível obter resultados reprodutíveis devido ao pequeno número de colónias e à variabilidade de crescimento após a transformação. |
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