Publicação

Desenvolvimento de um método analítico utilizando a técnica de microextração adsortiva em barra (BAμE) para a determinação de antidepressivos tricíclicos em matrizes biológicas

Detalhes bibliográficos
Resumo:	A depressão é uma doença mental comum e uma das maiores causas de incapacidade a nível mundial. Estima-se que afete cerca de 300 milhões de pessoas em todo o mundo, sendo que o consumo de antidepressivos tem vindo a aumentar, incluindo em Portugal. Os antidepressivos permitem que pessoas com depressão consigam viver vidas praticamente normais, sem quaisquer restrições. Os antidepressivos tricíclicos (TCAs), em particular, foram os primeiros a serem comercializados (1955) e ainda hoje são bastante prescritos. Contudo os antidepressivos, especialmente os clássicos, podem causar intoxicações graves se tomados em quantidades superiores às recomendadas, sendo que os TCAs possuem uma estreita gama terapêutica. A determinação dos níveis de TCAs é necessária para triagens toxicológicas de emergência, testes de drogas de abuso e exames forenses para fatalidades com probabilidade de terem sido causadas por overdoses de TCAs. Assim, é essencial desenvolver métodos com elevada sensibilidade, precisão, simplicidade e de fácil uso que permitam a determinação destes compostos em amostras biológicas (ex. urina). O presente trabalho consistiu no desenvolvimento, otimização, validação e aplicação de um método analítico alternativo, alicerçado na tecnologia de amostragem por flutuação, para a determinação de seis antidepressivos tricíclicos (amitriptilina, mianserina, trimipramina, imipramina, mirtazapina e dosulepina) em matrizes de urina. Para tal, recorreu-se à técnica de microextração adsortiva em barra seguida de microdessorção líquida e análise por cromatografia em fase gasosa com injeção de grandes volumes acoplada à espetrometria de massa operando no modo de monitorização de iões selecionados (BAμE-μLD/LVI-GC-MS(SIM)). Para otimização da metodologia desenvolvida, foram efetuados diversos estudos, sendo que o polímero octadecil Supelclean ENVI-18 (C18) demonstrou maior eficiência comparativamente às outras nove fases sorventes testadas. Em condições experimentais otimizadas (microextração: 16 h (990 rpm), pH 12, 5 % NaCl; retroextração: MeOH:ACN (50:50, v:v, volume), 30 min, sob tratamento ultrassónico) foi possível obter recuperações médias compreendidas entre 80,5 % e 99,6 %. Os limites de deteção situam-se entre 0,2 e 1,6 μg/L e, os de quantificação, em 10 μg/L. Verificou-se uma distribuição heterocedástica dos resíduos, pelo que foi realizada uma regressão linear ponderada para cada um dos analitos, tendo-se aplicado um fator de ponderação de 1/y. A gama de trabalho escolhida foi entre 10,0 e 1000,0 μg/L, contendo uma excelente linearidade (r2 > 0,9960). O efeito de matriz variou entre 90,2 % e 112,9 % (RSD < 13,9 %). Foi igualmente possível obter elevadas recuperações (92,3 % a 111,5 %; RSD < 12,26 %) e uma elevada eficiência do processo analítico (84,9 % a 124,3 %; RSD < 13,9 %). O método desenvolvido foi posteriormente aplicado a 52 amostras anónimas fornecidas por uma clínica de análises. Foi possível determinar a presença de amitriptilina numa das amostras (158,9 ± 1,9 μg/L), confirmada pelo tempo de retenção e espetro de massa. A metodologia proposta revelou ser uma estratégia alternativa para a análise de TCAs em matrizes de urina, apresentando como principais vantagens a utilização de pequenas quantidades de amostra e de solvente, fácil manipulação, simplicidade e excelente desempenho analítico.
Autores principais:	Oliveira, Mariana Neto de
Assunto:	Antidepressivos tricíclicos Microextração adsortiva em barra (BAμE) Tecnologia de amostragem por flutuação Cromatografia em fase gasosa acoplada à espetrometria de massa Urina Teses de mestrado - 2019
Ano:	2019
País:	Portugal
Tipo de documento:	dissertação de mestrado
Tipo de acesso:	acesso aberto
Instituição associada:	Universidade de Lisboa
Idioma:	português
Origem:	Repositório da Universidade de Lisboa

Descrição
Resumo:	A depressão é uma doença mental comum e uma das maiores causas de incapacidade a nível mundial. Estima-se que afete cerca de 300 milhões de pessoas em todo o mundo, sendo que o consumo de antidepressivos tem vindo a aumentar, incluindo em Portugal. Os antidepressivos permitem que pessoas com depressão consigam viver vidas praticamente normais, sem quaisquer restrições. Os antidepressivos tricíclicos (TCAs), em particular, foram os primeiros a serem comercializados (1955) e ainda hoje são bastante prescritos. Contudo os antidepressivos, especialmente os clássicos, podem causar intoxicações graves se tomados em quantidades superiores às recomendadas, sendo que os TCAs possuem uma estreita gama terapêutica. A determinação dos níveis de TCAs é necessária para triagens toxicológicas de emergência, testes de drogas de abuso e exames forenses para fatalidades com probabilidade de terem sido causadas por overdoses de TCAs. Assim, é essencial desenvolver métodos com elevada sensibilidade, precisão, simplicidade e de fácil uso que permitam a determinação destes compostos em amostras biológicas (ex. urina). O presente trabalho consistiu no desenvolvimento, otimização, validação e aplicação de um método analítico alternativo, alicerçado na tecnologia de amostragem por flutuação, para a determinação de seis antidepressivos tricíclicos (amitriptilina, mianserina, trimipramina, imipramina, mirtazapina e dosulepina) em matrizes de urina. Para tal, recorreu-se à técnica de microextração adsortiva em barra seguida de microdessorção líquida e análise por cromatografia em fase gasosa com injeção de grandes volumes acoplada à espetrometria de massa operando no modo de monitorização de iões selecionados (BAμE-μLD/LVI-GC-MS(SIM)). Para otimização da metodologia desenvolvida, foram efetuados diversos estudos, sendo que o polímero octadecil Supelclean ENVI-18 (C18) demonstrou maior eficiência comparativamente às outras nove fases sorventes testadas. Em condições experimentais otimizadas (microextração: 16 h (990 rpm), pH 12, 5 % NaCl; retroextração: MeOH:ACN (50:50, v:v, volume), 30 min, sob tratamento ultrassónico) foi possível obter recuperações médias compreendidas entre 80,5 % e 99,6 %. Os limites de deteção situam-se entre 0,2 e 1,6 μg/L e, os de quantificação, em 10 μg/L. Verificou-se uma distribuição heterocedástica dos resíduos, pelo que foi realizada uma regressão linear ponderada para cada um dos analitos, tendo-se aplicado um fator de ponderação de 1/y. A gama de trabalho escolhida foi entre 10,0 e 1000,0 μg/L, contendo uma excelente linearidade (r2 > 0,9960). O efeito de matriz variou entre 90,2 % e 112,9 % (RSD < 13,9 %). Foi igualmente possível obter elevadas recuperações (92,3 % a 111,5 %; RSD < 12,26 %) e uma elevada eficiência do processo analítico (84,9 % a 124,3 %; RSD < 13,9 %). O método desenvolvido foi posteriormente aplicado a 52 amostras anónimas fornecidas por uma clínica de análises. Foi possível determinar a presença de amitriptilina numa das amostras (158,9 ± 1,9 μg/L), confirmada pelo tempo de retenção e espetro de massa. A metodologia proposta revelou ser uma estratégia alternativa para a análise de TCAs em matrizes de urina, apresentando como principais vantagens a utilização de pequenas quantidades de amostra e de solvente, fácil manipulação, simplicidade e excelente desempenho analítico.