Publicação
Estudo da função mitótica de genes da família MOB
| Resumo: | Garantir a propagação fiel da informação genética através das gerações é um dos problemas mais fundamentais da biologia celular. MOB4, proteína integrante do complexo proteico STRIPAK, é um dos membros da família de proteínas MOB conhecidas por regular a mitose. Estudos de RNAi previamente desenvolvidos no nosso laboratório mostraram que a supressão de MOB4 promove defeitos mitóticos e um bloqueio no checkpoint na transição metafase/anafase em células humanas, caracterizando-o como um novo elemento essencial à correta segregação cromossómica. Este projeto tem como objetivo definir as funções moleculares de MOB4, especialmente o seu papel em mitose e perceber se os erros observados e o bloqueio em mitose se dão devido e exclusivamente ao MOB4 ou por este estar integrado no complexo STRIPAK. No decurso deste trabalho achámos também pertinente estudar a proteína MOB2 e a sua função em mitose. Começámos por estudar a dinâmica intracelular de MOB4 utilizando duas linhas celulares HeLa pela técnica de Imunofluorescência. Fomos igualmente testar a universalidade da sua função em células diploides tumorais como as HCT116, e não tumorais como as hTERT-RPE-1 através de estudos de RNAi. Por Imunofluorescência determinámos que MOB4 se localiza no Complexo de Golgi em Interfase. No entanto, não foi observada uma localização mitótica específica. Os resultados obtidos dizem-nos que a sua função parece ser conservada em células HCT116 uma vez que foram observados defeitos após depleção de MOB4, embora não ter sido observado um bloqueio no checkpoint. Também foi observado que componentes do complexo STRIPAK não só parecem ser necessários para que o bloqueio seja ultrapassado, como a sua falta promove defeitos mitóticos semelhantes aquando depleção exclusiva do MOB4. Deste modo deduzimos que MOB4 não atua sozinho, mas sim em conjunto com o STRIPAK. A MOB2 possui uma função ao nível do fuso mitótico e promove igualmente um bloqueio no checkpoint mitótico. |
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| Autores principais: | Lousa, Inês Saramago dos Santos |
| Assunto: | MOB4 STRIPAK Mitose Transição metafase/anafase Teses de mestrado - 2023 |
| Ano: | 2023 |
| País: | Portugal |
| Tipo de documento: | dissertação de mestrado |
| Tipo de acesso: | acesso aberto |
| Instituição associada: | Universidade de Lisboa |
| Idioma: | português |
| Origem: | Repositório da Universidade de Lisboa |
| Resumo: | Garantir a propagação fiel da informação genética através das gerações é um dos problemas mais fundamentais da biologia celular. MOB4, proteína integrante do complexo proteico STRIPAK, é um dos membros da família de proteínas MOB conhecidas por regular a mitose. Estudos de RNAi previamente desenvolvidos no nosso laboratório mostraram que a supressão de MOB4 promove defeitos mitóticos e um bloqueio no checkpoint na transição metafase/anafase em células humanas, caracterizando-o como um novo elemento essencial à correta segregação cromossómica. Este projeto tem como objetivo definir as funções moleculares de MOB4, especialmente o seu papel em mitose e perceber se os erros observados e o bloqueio em mitose se dão devido e exclusivamente ao MOB4 ou por este estar integrado no complexo STRIPAK. No decurso deste trabalho achámos também pertinente estudar a proteína MOB2 e a sua função em mitose. Começámos por estudar a dinâmica intracelular de MOB4 utilizando duas linhas celulares HeLa pela técnica de Imunofluorescência. Fomos igualmente testar a universalidade da sua função em células diploides tumorais como as HCT116, e não tumorais como as hTERT-RPE-1 através de estudos de RNAi. Por Imunofluorescência determinámos que MOB4 se localiza no Complexo de Golgi em Interfase. No entanto, não foi observada uma localização mitótica específica. Os resultados obtidos dizem-nos que a sua função parece ser conservada em células HCT116 uma vez que foram observados defeitos após depleção de MOB4, embora não ter sido observado um bloqueio no checkpoint. Também foi observado que componentes do complexo STRIPAK não só parecem ser necessários para que o bloqueio seja ultrapassado, como a sua falta promove defeitos mitóticos semelhantes aquando depleção exclusiva do MOB4. Deste modo deduzimos que MOB4 não atua sozinho, mas sim em conjunto com o STRIPAK. A MOB2 possui uma função ao nível do fuso mitótico e promove igualmente um bloqueio no checkpoint mitótico. |
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