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Efeito do fumo de tabaco e da sobre-temperatura na fertilidade masculina: um estudo em Drosophila melanogaster in vivo e em linfócitos humanos in vitro

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Resumo:No decorrer das últimas décadas, a fertilidade em humanos tem decrescido, o que pode ser devido a mudanças ambientais como a poluição, a sobre-temperatura e hábitos sociais como o aumento do consumo de tabaco. Existe uma controvérsia na literatura no que se refere à influência que a sobre-temperatura e o consumo do tabaco possa ter na fertilidade masculina. O presente trabalho visa estudar o impacto de dois agentes ambientais (a sobre-temperatura e o fumo do tabaco) na fertilidade masculina usando como modelo a D. melanogaster (in vivo) e os linfócitos humanos (in vitro). Os principais objetivos deste trabalho foram determinar a fertilidade, prolificidade, toxicidade dos progenitores, a longevidade da primeira geração (F1) e os efeitos genotóxicos nos espermatozoides de D. melanogaster, como também, a análise morfológica dos espermatozoides e a análise do comportamento sexual dos machos aplicando estes dois agentes. Nestes ensaios foram utilizadas duas linhagens, a do tipo selvagem (Oregon K, OK) que devido as suas características permitem compreender a influência destes agentes e a possível extrapolação para o homem, e a linhagem mus 308 deficiente para a proteína Mus308 (proteína, homóloga da polimerase humana POLQ DNA polymerase) de forma a aumentar a sensibilidade a estes agentes. Os machos de cada linhagem com diferentes idades foram expostos aos agentes ambientais (no caso da sobre-temperatura a 30ºC durante 2 h e no caso do fumo de tabaco durante 1 min). Paralelamente, avaliámos os efeitos genotóxicos em linfócitos humanos usando o ensaio do cometa de forma a medir os danos basais e oxidativos no ácido desoxirribonucleico (DNA). Pode-se verificar que em D. melanogaster ocorreu diferenças nas duas linhagens devido a linha mus 308 ser deficiente no sistema de reparação. Podemos concluir que em ambos os agentes foram afetados a fertilidade, prolificidade e longevidade da descendência de modos diferentes nas duas linhagens. O fumo do tabaco foi tóxico principalmente para a linha mus 308. Apenas foi verificada alterações morfológicas na linha mus 308 em ambos os agentes. Foi verificado um aumento do tempo entre o visionamento da fêmea e os primeiros passos no comportamento sexual do macho em ambas as linhas. No caso dos linfócitos humanos em ambos os agentes provocaram danos basais no DNA.
Autores principais:Gajeiro, Ana Filipa Norberto
Assunto:Fertilidade Drosophila melanogaster linfócitos humanos sobre-temperatura tabaco ensaio do cometa
Ano:2024
País:Portugal
Tipo de documento:dissertação de mestrado
Tipo de acesso:acesso embargado
Instituição associada:Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro
Idioma:português
Origem:Repositório da UTAD
Descrição
Resumo:No decorrer das últimas décadas, a fertilidade em humanos tem decrescido, o que pode ser devido a mudanças ambientais como a poluição, a sobre-temperatura e hábitos sociais como o aumento do consumo de tabaco. Existe uma controvérsia na literatura no que se refere à influência que a sobre-temperatura e o consumo do tabaco possa ter na fertilidade masculina. O presente trabalho visa estudar o impacto de dois agentes ambientais (a sobre-temperatura e o fumo do tabaco) na fertilidade masculina usando como modelo a D. melanogaster (in vivo) e os linfócitos humanos (in vitro). Os principais objetivos deste trabalho foram determinar a fertilidade, prolificidade, toxicidade dos progenitores, a longevidade da primeira geração (F1) e os efeitos genotóxicos nos espermatozoides de D. melanogaster, como também, a análise morfológica dos espermatozoides e a análise do comportamento sexual dos machos aplicando estes dois agentes. Nestes ensaios foram utilizadas duas linhagens, a do tipo selvagem (Oregon K, OK) que devido as suas características permitem compreender a influência destes agentes e a possível extrapolação para o homem, e a linhagem mus 308 deficiente para a proteína Mus308 (proteína, homóloga da polimerase humana POLQ DNA polymerase) de forma a aumentar a sensibilidade a estes agentes. Os machos de cada linhagem com diferentes idades foram expostos aos agentes ambientais (no caso da sobre-temperatura a 30ºC durante 2 h e no caso do fumo de tabaco durante 1 min). Paralelamente, avaliámos os efeitos genotóxicos em linfócitos humanos usando o ensaio do cometa de forma a medir os danos basais e oxidativos no ácido desoxirribonucleico (DNA). Pode-se verificar que em D. melanogaster ocorreu diferenças nas duas linhagens devido a linha mus 308 ser deficiente no sistema de reparação. Podemos concluir que em ambos os agentes foram afetados a fertilidade, prolificidade e longevidade da descendência de modos diferentes nas duas linhagens. O fumo do tabaco foi tóxico principalmente para a linha mus 308. Apenas foi verificada alterações morfológicas na linha mus 308 em ambos os agentes. Foi verificado um aumento do tempo entre o visionamento da fêmea e os primeiros passos no comportamento sexual do macho em ambas as linhas. No caso dos linfócitos humanos em ambos os agentes provocaram danos basais no DNA.